琼脂糖凝胶回收试剂盒-Qiagen公司

Qiagen公司的琼脂糖凝胶回收试剂盒：MinElute Gel Extraction Kit

品牌：Qiagen

回收范围：70bp-4kb

价格：（50包装1,485，约29元/反应）

特点：

• 洗涤体积只要10μl，回收产物浓度高，方便后继实验
• 使用方便快捷（wash-and-spin)
• 高回收率

• 回收产物纯度高，可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外转录等后继实验

使用心得：

如果要回收片断量本来就很少，比如只有几十个ng，用常规的试剂盒洗脱得到将近50ul的产物，连接反应就很难做――要不体积很大，要不会觉得浓度太低。如果是用来做显微注射、标记等实验就更难受，只能再浓缩一次，不但麻烦，多一次操作也会导致产物进一步的损耗。这一点，就是快速的柱回收试剂盒比传统方法不如的地方，因为传统方法得到沉淀后可以按照需要溶解得到自己需要的浓度，柱回收就不行。MinElute就是为这个需要而诞生的。MinElute胶回收试剂盒是基于一种特殊的Silica gel menbrane的膜技术，能在高盐浓度的条件下迅速吸附DNA，在低盐或者纯水条件下释放DNA，只要短短几分钟，就能彻底除去包括引物、核苷酸、酶、矿物油、盐、琼脂糖、EB以及其它杂质，和以前QIAGEN的Silica gel menbrane有所不同的是，它要求的洗脱体积非常小，只要10μl（当然这更要注意让洗脱液加在膜上），纯化的DNA是高度浓缩的，回收率在80%以上。这样就非常适合用于后继实验操作，不需要再浓缩一次。

MinElute为了确保高质量和高回收率，利用了特殊的binding buffer，这种缓冲液是特别设计和优化了的，可以增加DNA分子特异性吸收，减少杂质，不过也带来了一个问题，那就是导致MinElute的DNA吸附范围是70bp到4kb，而不是以往的10kb，因此4kb以上的只能用Qiagen的Qiaquick或其它产品了，而10kb以上就该用QIAEX II系列。此外MinElute柱子的载量是5ug，毕竟洗脱体积这么小。

体积小则小矣，可是质量并不含糊，回收的产物可以用于PCR、克隆、标记、测序、体外转录等后继实验，也同样可以用于显微注射、芯片分析等要求非常严格的实验。你尽管可以说，我又不需要做那些严格实验，我就克隆PCR什么的就够了，哪儿要那么纯――然而你也不能否认这本来就是一种质量可靠的信心保证。

除了以上几个方面，MinElute系列产品正如Qiagen其它产品一样：讲究精确完美，注重细节品质。MinElute有三种上样Buffer染料颜色（青、蓝和黄），方便样品分析，并且也包含pH目测指示染料，可以在溶胶的时候帮助指示实验错误（pH值对胶回收影响较大，见下）――错误的颜色代表了凝胶Buffer重复使用等实验配置不当导致的不正确化合物，这种情况可通过醋酸钠进行调整。