溶血试验的原理及注意事项
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溶血试验是国标中规定的一种对细菌进行筛选鉴定的方法。常用于链球菌、弧菌、白喉杆菌等的区分鉴定。
基本原理:
不少细菌都能产生溶血素,可以溶血平板,因此在这些细菌周围会出现溶血环。不同细菌产生的溶血素不同,比如:
溶血素类型 | 溶血素类型 | ||
产气荚膜梭菌 | 卵磷脂酶 | 肺炎球菌 | 肺炎溶素 |
溶血性链球菌 | 链球菌溶血素 O/S | 葡萄球菌 | α、β、γ、δ、ε溶血素 |
破伤风杆菌 | 破伤风溶素 | 李斯特菌 | 溶血素 O |
其中α溶血:又称草绿色溶血,菌落周围培养基出现 1~2 mm 的草绿色环,为高铁血红蛋白所致,α溶血环中的红细胞未完全溶解。可形成α-溶血环的细菌如甲型溶血性链球菌、肺炎链球菌。
β溶血是细菌在血平板上培养时,菌落周围形成的宽大(2~4 mm)、界限分明、完全透明的溶血环。β溶血环中的红细胞完全溶解,是细菌产生的溶血素使红细胞完全溶解所致,又称完全溶血。可形成β溶血环的细菌如乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等。
γ溶血:又称不溶血。菌落周围培养基出现灰白色细小菌落,在菌落周围无溶血环。可形成的细菌为丙型链球菌。
试验方法:
由于不同细菌所产的溶血素不同,因此做溶血试验时对应的实验条件和试验方法也不一样,下面就简单的介绍一下:
1. 链球菌溶血试验:用羊血悬液,37 摄氏度下培养较短时间即可观察到溶血现象。
2. 白喉杆菌:用含兔血成分的培养,需隔夜培养。
3. 弧菌溶血试验:用无菌脱纤维山羊血培养基,37 摄氏度下培养 1 天,全部或大部分红血球被溶解方可判定为阳性。
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