原理
阵发性寒冷性血红蛋白尿症(PCH)是一种自身免疫性溶血综合征患者体内产生一种冷反应性抗体(D-L抗体),这种抗体是一种IgG,在37℃下与红细胞不能牢固结合,当温度低至20℃以下时,如有补体存在D-L抗体便能结合于红细胞表面,当温度再增高至37℃时,由于一系列补体参与反应使红细胞膜上形成空洞,发生溶血.
材料与仪器
豚鼠
生理盐水
离心机
生理盐水
离心机
步骤
一、实验试剂:补体制备:抽取豚鼠心脏血液2-4ml.分离其血清,保存于冰箱.临用时以生理盐水作1:10稀释.
二、实验操作:
1. 取用者及同型或O型正常人血各8ml,以玻璃珠去纤维蛋白的方法分别制备血清与红细胞悬液或者取其中6ml应不予抗凝,分高血清.余下的2ml抗凝,以分离红细胞.
2. 用生理盐水洗涤红细胞三次,最后制成50%红细胞悬液.
3. 按表l-3-7滴加各液,经培育后离心1000r/min,5min观察溶血现象。
三、实验结果判断:若第1、第2管溶血,其余管不溶血为阳性
二、实验操作:
1. 取用者及同型或O型正常人血各8ml,以玻璃珠去纤维蛋白的方法分别制备血清与红细胞悬液或者取其中6ml应不予抗凝,分高血清.余下的2ml抗凝,以分离红细胞.
2. 用生理盐水洗涤红细胞三次,最后制成50%红细胞悬液.
3. 按表l-3-7滴加各液,经培育后离心1000r/min,5min观察溶血现象。
三、实验结果判断:若第1、第2管溶血,其余管不溶血为阳性
注意事项
操作中第1、第2管最好在20℃以下进行操作
注:患者与正常人血清总量56℃灭能30min(第四号试管)
注:患者与正常人血清总量56℃灭能30min(第四号试管)
来源:丁香实验