离子选择电极法测定钾(钠)
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【原理】
离子选择电极是一种电化学敏感器,它能对特定离子产生响应,通过与参比电极构成的电化学测量回路,可选择性测定溶液中特定离子的活度。钾电极的离子选择性材料是含缬氨霉素的PVC膜,钠电极是二氧化硅基质中氧化钠和氧化铝分子构成的玻璃膜。当离子选择电极置于测量溶液中,敏感膜与溶液界面的离子发生交换或扩散而产生膜电位,通过与参比电极相比较测得电极电位。待测标本的离子活度与电极电位关系符合下述Nernst方程:
RT
E=E0+g(x)
ZF
式中E为测得的电位;E0为标准电极电位(常数);R为气体常数;T为绝对温度;F为法拉第常数;Z为离子价;(x)为离子的活度。
由公式可见,测得的电极电位与离子活度的对数成比例,当活度系数保持恒定时,电极电位与离子浓度的对数也成比例,以此可求出溶液中离子的浓度。
离子选择电极法分为直接法和间接法两种。直接法是指标本(全血、血浆、血清)不经稀释直接上机测定;间接法是指标本(血清或血浆)用一定离子强度与pH值的稀释液按一定比例稀释后再上机测定。
【试剂】
离子选择电极法测定钾、钠,一般由仪器厂家提供试剂盒,不同仪器试剂组分有些差别,通常包含以下4种试剂:
(1)校准液:一般有两个浓度校准液,即高校准和低校准,是一种含有标准钾、钠浓度的缓冲液,pH值一般在7.4左右。分析样品前必须用这两种校准液以两点定标的方式建立测定的斜率曲线。
(2)饱和氯化钾溶液:用分析纯以上的氯化钾配制(25℃)。用作参比电极的电极液。
(3)电极液:用于钾、钠测量电极的内填充。
(4)电极保养液:一般有两种溶液,一种是去蛋白液,为酸性胃蛋白酶溶液或弱碱性胰蛋白酶溶液,用于除去测定毛细管道中粘附的蛋白质和脂类;另一种是玻璃膜电极的保养剂,常用氟化氢铵配制,对玻璃膜电极有蚀化作用,电极浸泡后可恢复反应敏感性。
【操作】
由于仪器型号不一,使用方法也有所不同,一般包括下列步骤:
(1)开机程序:开启电源后,仪器自,冲洗管道,等候电路稳定。
(2)定标:可分为全自动液体循环自动定标和手工提供校准液定标,多数离子选择电极直接法定标为前者,离子选择电极间接法定标为后者。每天开机首次定标一般均需做两点定标,即用高低两种浓度的校准液做线性测定。仪器均有规定的斜率范围,如果超出规定范围为定标失败,说明测量电极响应不佳或校准液浓度与理论值误差较大,或电极需要维护。
(3)测定质控液、待测标本。
(4)显示或打印结果。
(5)关机:每天使用完毕后先清洗管道再关机。