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超氧化物歧化酶与氧化应激的分析方法

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超氧化物歧化酶(SOD)


在氢离子与超氧化物发生反应生成过氧化氢和氧的过程中,SOD充当催化酶作用。人类线粒体中存在着含锰(Mu)的SOD(MuSOD),细胞浆则为含铜(Cu)、含锌(Zn)的SOD。目前还认为,SOD尚有存在于细胞外的其它3种类型。


线粒体虽可代谢掉细胞中氧的95%以上,但因该处缺少组蛋白,故超氧化物等引起的氧化应激比较弱,而MuSOD将在此类防御机制中发挥重要作用。


更有报道帕金森病患者,其MuSOD基因呈现多样性,而MuSOD活性降低则可见于先天性肌营养不良等许多遗传病,特别是对于神经变性疾病具有的重要意义更是受到研究者们的极大重视。目前发现,在同样是属于变性疾病的糖尿病患者,其白细胞亦出现了MuSOD活性低下。


MuSOD与CuSOD、 ZuSODn不同,前者在面对应激时将表达增强。只是,在人类随着年龄的增加此作用消失,故认为MuSOD亦与老化有关。可见,MuSOD的意义正不断得到阐明,不过遗留下来的和老化、疾病相关的问题也不少。那么,都有哪些疾病与SOD表达/功能不全有着直接及间接的关系?这是今后应当积极研究的课题。


细胞氧化应激检测:


氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时体内高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen speciesROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen speciesRNS)产生过多氧化程度超出氧化物的清除氧化系统和抗氧化系统失衡从而导致组织损伤。


在氧化应激过程中,由于受到自由基的氧化胁 迫,构成细胞组织的各种物质如脂质、糖类、蛋白质、脱氧核糖核酸(DNA)等所有的大分子物质,都会发生各种程度的氧化反应,引起变性、交联、断裂等氧化 损伤,进而导致细胞结构和功能的破坏以及机体组织的损伤和器官的病变,甚至癌变等。


氧化应激的定量评价方法大致分做三类:


1)测定由活性氧修饰的化合物;


2)测定活性氧消除系统酶和抗氧化物质的量;


3)测定含有转录因子的氧化应激指示物。


而根据氧化应激的物质种类,又可主要分为蛋白质氧化损伤标志物检测、脂质过氧化标志物检测、核酸DNA/RNA损伤检测以及活性氧消除系统酶和抗氧化物质检测等。


美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为您提供完备的细胞氧化应激分析解决方案,其产品包含蛋白质羰基化、硝基化损伤及晚期氧化蛋白产物(AOPP)分析,脂质过氧化的标志物壬烯(HNE)和丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a快速检测试剂盒,核酸DNA/RNA的常规损伤分析如8-OHdG/8-OHG和AP位点检测,还包括细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析试剂盒;


除此之外,还有多种抗氧化物的活性检测方案供您选择,如过氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶 (CAT)及ORAC指标(氧基抗氧化能力)和HORAC指标(羟基抗氧化能力)等。


蛋白质氧化损伤分析(Assay for Oxidative Protein Damage)


在氧化应激过程中,自由基对蛋白质的作用包括蛋白质肽链断裂、蛋白质分子相互间交联聚合、蛋白质氨基酸发生氧化脱氨反应、氧自由基攻击蛋白质还原性 基团、脂类氧化裂解所产生的丙二醛与蛋白质上的氨基产生分子间的交联等。


目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个,分别是蛋白羰基生成(羰基化)和二酪氨酸的生成(蛋白质中酪氨酸硝基化)。


Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案,其OxiSelect? Protein Carbonyl Assay Kits(蛋白质糖基化分析试剂盒)专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后,其羰基化程度;


OxiSelect? Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits(蛋白质硝基化分析试剂盒)为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案;而OxiSelect? AOPP Assay Kits(晚期氧化蛋白产物分析试剂盒)则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。


脂质过氧化分析(Assay for Lipid Peroxidation)


脂质过氧化现象在动物和植物中都会发生,并且已经被用作细胞和组织氧化应激下的反应标志物。脂质过氧化为ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应。


形成脂质过氧化产物(lipid peroxide LPO)如丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(HNE),从而使细胞膜的流动性和通透性发生改变最终导致细胞结构和功能的改变。4-羟基壬烯醛(HNE)和丙二醛(MDA)是两个强毒力的脂质过氧化终产物常常是作为判断脂质过氧化的指标。

西美杰向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell BioLabs的细胞氧化压力检测全套方案,该方案中包括的脂质过氧化分析检测试剂除包括经典的脂质过氧化指标4-羟基壬烯醛(HNE)和丙二醛 (MDA)的快速ELISA检测和基于TBRS(硫代巴比妥酸反应物)的MDA定量分析,还有在动脉粥样化形成、风湿性关节炎以及癌变的过程中脂质过氧化重要检测指标8-异前列腺素F2a的ELISA分析试剂盒。 (责任编辑:大汉昆仑王)

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