冷冻切片操作

1.冷冻切片机要始终处于运行状态，即使在不做冷冻切片时也要开着致冷，不能时开时关，以免影响机器寿命。

2.手术取下的新鲜组织不要固定，因固定过的组织不利于切片，而且还会影响染色。

3. 用OCT做包埋剂，起到支撑的作用。先将OCT标在固定头上再将组织放在OCT上，OCT不要太多，以免流到固定头外，组织表面露在OCT外。

4. 外固定头放在冷冻机内的速冷台上，在-25℃左右，冻10min，视组织不同而时间略有差异，组织较大或脂肪组织时间可长一些，一般情况下10min左右即 可。如果冷冻不足，则切片可呈粥糜状或切不下来；如果冷冻过分，则切片呈碎悄状或切片上呈条痕状，都得不到良好的切片。

5.高速刀的角度，固定好，切片刀要快。

6. 把冻好的冻头夹到切片机上，用精调修平组织，使其暴露最大切面，将微调刻度调在5μm，放下抗卷板开始切片，得到满意切片后，打开抗卷板，将组织贴在载玻片上。载玻片要放平。动作要稳，一次完成，这样才能将切片完整的贴在载玻片上。

7.切片晾干后用95%乙醇固定10s，水洗后进行常规染色。

8.冷冻切片完成后取下冻头组织，固定后做常规切片。将冷冻机内的组织碎屑清扫干净，定期打开紫外线消毒。