组织培养基母液的配制
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一、仪器及药品：
冰箱、天平（0.0001g）
容量瓶: 1000 ml, 500 ml、250 ml、100 ml、25 ml
广口储液瓶：500 ml、250 ml、50 ml、25 ml
烧杯：1000 ml 、500 ml 、250 ml、100 ml 、50 ml
数十根玻璃搅棒、大药勺、小药勺或挖耳勺 标签纸、胶水、50%酒精、95%酒精、1 mol/L盐酸、1 mol/L NaOH
几种常用的培养基所需的大量元素、微量元素、有机物、激素、铁盐等药品 蒸馏 水
二、方法和步骤：
按照培养基配方,把大量元素、微量元素、铁盐、有机物、植物激素分类,每一类中各种药品分别称量,如N 6 培养基各种母液的配制步骤如下：
大量元素母液：包括用量较大的几种化合物〈见N 6 培养基配方〉，按表中排列顺序,将每种药品的用量扩大10倍，分别称取，分别溶解，然后按照顺序混合在一起。如钙盐等易发生沉淀的药品不能混合，应单位定容，最后加上 蒸馏 水，定容至1升或500毫升。
在定容时注意用蒸馏水洗净烧杯和玻璃搅棒以减少误差。定容后的溶液为大量元素母液，配制培养基时，每配1 L培养基需吸取该母液l00 ml或50 ml。
微量元素母液：因用量少，为了称量精确和方便,常配成 100倍或1000倍的母液，即每种药品扩大l00倍或者l000倍。逐个溶解，混合在一起成为微量元素母液，每配1 L N 6 培养基需吸取该母液10 ml或者1 ml。
铁盐：在N 6 培养基中需要单独配制，它是由硫酸亚铁（FeSO 4 •7H 2 O）2.78 g和乙二氨四乙酸二钠（Na 2 -EDTA）3.73 g，分别溶解，混合后，用酒精灯加热半小时以上，冷却后定容至1 L。冰箱过夜贮藏无结晶析出，否则重新配制。每配l升N 6 培养基需加该铁盐母液5 ml。
有机物质：主要指氨基酸， 维生素 类物质。它们大都是扩大1000倍，分别称量，分别定容和储存，配制培养基时按需要的量加入。
植物 激素 ：常用的有生长素类如：2,4-D、 萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA）；细胞分裂素类：激动素（KT）、6-苄基氨基嘌呤（6-BA）、玉米素（ZT）。配制时需要单个称量，根据需要可分别用酸、碱或酒精等不同的溶剂溶解后 ,再用蒸馏水配制成所需的浓度，一般为每ml含 0.1-2 mg，配制培养基时按所需要的量分别加入，本实验中的2,4-D和6-BA均配成1 mg/ml的母液。
在配制吲哚乙酸（IAA）母液时，先用几滴95%酒精溶解完全后，加蒸馏水定容，否则会发生沉淀。而配制6-BA母液时，要用少量的1 mol/L NaOH溶解；而配制2,4-D时，可先用少量的95%酒精溶解。
表1 N 6 朱至清(1975)培养基配方| 药品名 | 配方量(mg/L) | 母液倍数 | 称取量(g/L) | |
| (NH 4 ) 2 SO 4 |
大量元素 |
463 |
10× |
4.63 |
| KNO 3 | 2 830 | 28.3 | ||
| CaCl 2 ·2H 2 O | 166 | 1.66 | ||
| MgSO 4 ·7H 2 O | 185 | 1.85 | ||
| KH 2 PO 4 | 400 | 4.0 | ||
| Na 2 - EDTA | 铁盐 | 37.3 | 100× | 3.73 |
| FeSO 4 ·7H 2 O | 27.8 | 2.78 | ||
| MnSO 4 ·4H 2 O |
微量元素 |
4.0 |
1000× |
4.0 |
| ZnSO 4 ·7H 2 O | 3.8 | 3.8 | ||
| H 3 BO 3 | 1.6 | 1.6 | ||
| KI | 0.8 | 0.8 | ||
| 盐酸硫胺素(VB 1 ) |
有机物质 |
1 |
1000× |
1.0 |
| 烟酸 | 0.5 | 0.5 | ||
| 盐酸吡哆醇(VB 6 ) | 0.5 | 0.5 | ||
| 甘氨酸 | 2.0 | 2.0 |
三、注意事项
如药品所带结晶水不同，应进行换算。
