DNA电泳带型原因分析及解决办法

相关专题

DNA跑完电泳后，需要进行带型分析，电泳图上的带型可能有出现许多状况。那么如何根据DNA电泳带型结果调整自己的实验呢?这里简单的做个介绍。

<center> <img alt="DNA电泳带型原因分析及解决办法" height="281" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/08/27/A1377590510.JPG" width="356" /></center>

DNA电泳需要进行带型分析，在实验过程中常会发现所得的带型出现在这样那样的问题。在此，对DNA带型做了相应的分析。带型原因分析解决办法弱带或无带上样的DNA量不够增加DNA的上样量，聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂 糖电泳灵敏度稍高DNA降解避免DNA。

带型	原因分析	解决办法
弱带或无带	上样的DNA量不够	增加DNA的上样量，聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂 糖电泳灵敏度稍高
DNA降解	避免DNA的核酸酶污染	&NBS p;
电泳时间过长，DNA跑出	减短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度	&NBS p;
EB染色的DNA，紫外光源不合适	应用短波长（254 nm），增强紫外灯灵敏度	&NBS p;
DNA带缺失	小DNA带走出凝胶	减短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度
分子大小相近的DNA带不易分辨	增加电泳时间，核准正确的凝胶浓度
DNA 变性	电泳前请勿高温加热DNA链，以20 mM NaCl Buffer稀释DNA
巨大DNA链，凝胶电泳不合适	在脉冲凝胶电泳上分析
DNA带模糊	DNA降解	避免核酸酶污染
DNA上样量过多	减少凝胶中DNA上样量
所用电泳条件不合适	电泳时电压不应超过20 V/cm，温度＜30℃，巨大DNA链，温度应＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力
DNA样含盐过高	电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐
有蛋白污染	电泳前酚抽提去除蛋白
DNA变性	电泳前勿加热，用20 mM NaCl缓冲液稀释DNA
不规则DNA带迁移	对于λ/Hind III片段COS位点复性	电泳前加热DNA 65℃加热5-10分钟，然后在冰上冷却5分钟
电泳条件不合适	电泳电压不超过20 V/cm，温度＜30℃，电泳缓冲液有足够的缓冲能力
DNA变性	以20 mM NaCl Buffer稀释DNA，电泳