沉淀反应：对流免疫电泳实验

免疫电泳实验

免疫电泳实验是先将抗原物质在琼脂凝胶中做电泳分离，然后于凝胶槽中加入抗体血清。使抗原抗体进行双向扩散，在比例适宜部位形成特异的抗原抗体沉淀弧线。每条沉淀弧线代表一组抗原抗体复合物，故可用抗原成分分析；且可以根据其迁移率与抗体所出现的特异反应进行鉴定。

1、材料

（1）待检标本（抗原）：正常人血清；

（2）抗体：正常人血清的家兔免疫血清；

（3）1.5%离子琼脂（系用巴比妥缓冲液配制的）；

（4）电泳仪；

（5）pH8.6、离子强度0.05M巴比妥缓冲液配方：巴比妥1.84克，巴比妥钠10.3克，加蒸馏水1000毫升，调pH至8.6；

（6）其它：载物玻片，直径3毫米打孔器，20mmⅹ2mm玻璃铸型，微量进样器。

2、方法

（1）取载物玻片（7.5ⅹ2.5厘米）加上3.5毫升1.5%琼脂凝胶，制成2毫米厚的琼脂板；

（2）按图位置，在琼脂板未凝固时，放入抗血清槽铸型，注意勿使铸型全部浸入琼脂中，待凝固时再打孔；

（3）加待检标本：用微量进样器往孔中加1—5微升；

（4）电泳：电压9—7伏/厘米，泳动15—20小时；

（5）电泳后取出抗血清槽铸型，加入抗血清，进行双扩散，一般在24小时内沉淀弧出全；

（6）观察结果：或描绘、拍照或进行染色，染色后的标本便于结果分析及保存。