玻片凝集试验（Slide agglutination test）

【原理】

玻片凝集的原理与试管凝集相同，一般均用于诊断未知抗原，如用已知的免疫血清诊断未知的细菌和血型鉴定等。由于方法简便，并具有较高的敏感性和一定的特异性，故迄今仍为各实验室所应用。

玻片凝集的反应时间短（应在2~5分钟左右出现凝集），因而对免疫血清的浓度应相应提高（如该免疫血清试管凝集效价在1:1280以上时，应做1:20稀释以作为玻片凝集的抗体最合适的稀释度）。本实验方法只能用作定性实验。

【材料】

1:20抗羊红细胞免疫血清（用生理盐水配制）

1:20抗鸡红细胞免疫血清（同上）

羊红细胞及鸡红细胞

生理盐水

载玻片、尖吸管、红蜡笔、牙签等。

【方法】

1．取洁净载玻片一张，用红蜡笔画分三格并标明次序。

2．用尖吸管3支分别取抗鸡、抗羊红细胞免疫血清及生理盐水各一滴，分别滴加于载玻片所画出的三个格内。（或用微量加样器分别各取25μl加至载玻片三个格内）。

3．再用另一支尖吸管吸取羊或鸡红细胞一种，于三格内各加入一滴（亦可用微量加样器每格内各加25μl）。

4．用牙签将血细胞与免疫血清及生理盐水充分混匀。注意每混匀一格必须更换牙签或将使用过的一端折断才能混匀另一格，否则将会出现交叉凝集，影响实验结果。

5．将玻片轻轻摇动1~2分钟，观察结果并记录报告。

沉淀反应（Precipitation reaction）

可溶性抗原与相应的抗体相结合，当两者比例合适并有电解质存在及一定的温度条件下，经一定的时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应。沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等。与相应的抗体比较，抗原分子小（<0.2微米），单位体积中所含的抗原量要多，具有较大的反应面积。

为了使抗原抗体之间比例合适，不使抗原过剩，故一般均应稀释抗原，并以抗原最高稀释度（可达1:40,000）仍能与抗体出现沉淀反应为该抗体的沉淀反应效价（滴度），如环状沉淀试验。

若需用稀释抗体的方法测定该抗体的效价。则需将免疫血清做高浓度低倍稀释（自1:4~1:140左右）并将抗原制成一标准浓度才能进行检测，否则就不能出现反应，如单向及双向免疫扩散试验。

根据抗原与抗体的不同条件及其它因素，沉淀反应可以分为以下三种主要形式。

既：环状沉淀反应（Rnig precipitation reaction）；凝胶中沉淀反应（Precipitation reaction in gel），如单向扩散、双向扩散、对流电泳、免疫电泳等；及微 生物 学实验中的絮状沉淀反应（Floccuiation precipitation reaction），如梅毒血清中的康氏（Kahn）及克莱氏（Kline）试验以及检测白喉杆菌毒力的体外试验—Elek氏试验，检测毒素或类毒素的絮状沉淀单位测定等