均相荧光免疫测定

均相荧光免疫测定（homogeneous fluorescence immunoassay）是根据1972年Rubenstein等建立的均相酶免疫测定法（HEI）发展形成的一种新型免疫荧光分析技术。所谓“均相”是指在反应结束后无须对游离和结合的标记物进行分离，直接测定即可。

均相荧光免疫测定是利用荧光的一些特殊的理化特性（如荧光的激发、吸收、淬灭等），在标记抗原与特异性抗体结合后发生改变，据此设计建立的各种试验方法。

一、荧光淬灭免疫测定

荧光淬灭免疫测定（fluorescencequenchingimmunoassay）反应系统内除待测药物外，同时加入某种待测小分子抗原和一定量用荧光物质标记的该抗原，二者与有限量的特异性抗体竞争结合。

当抗体与此种标记抗原结合时，发生淬灭作用使荧光物质的荧光消失；因而无须分离直接测定反应系统的偏振荧光强度。如样品中未标记抗原含量高，则竞争结合的抗体多，使游离的标记抗原增多，经紫外光激发后荧光强度高，二者呈正相关，据此可以定量测定样品抗原含量。

二、荧光保护免疫测定法

1982年，Hanssan等在试验中引入了抗荧光素抗体，以淬灭反应系统中的游离荧光素。而对于已和特异性抗体结合的标记抗原的荧光则无影响，即特异性抗体与标记抗原结合后，可以保护其荧光免受抗荧光素抗体的淬灭作用，从而达到均相反应的要求。

当样品中未标记的待测抗原含量高时，竞争与特异性抗体结合，使游离的荧光素标记抗原增多，由于受到抗荧光素抗体的淬灭作用，受激发后荧光产生量反而减少，二者呈负相关，据此可以定量测定样品中待测抗原的含量。

荧光保护免疫测定法（fluorescence protectionimmunoassay）可用于测定甲状腺素、人血清清蛋白、IgG等。