流式细胞术在组织化学与免疫组织化学中的应用
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概括地说,流式细胞技术是通过流式细胞仪(flowcytometer)对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数、快速和准确地定量分析和分选。
流式细胞术在生物医学领域中应用十分广泛。
凡能被荧光分子标记的细胞或微粒均能用于流式细胞仪检测。如在细胞周期研究中,根据DNA荧光染料(如PI)与细胞DNA双链的结合有一定量效关系,即DNA含量的多少与PI结合量成正比,因此,通过荧光强度可以反映细胞内DNA含量。
在免疫学中,运用流式细胞术与单克隆抗体结合,在免疫分型、细胞分选、肿瘤细胞免疫监视、机体免疫状态监测、免疫细胞的系统发生及特性研究等方面均起着极为重要的作用。在肿瘤学中,利用流式细胞术除了进行细胞周期和DNA倍体分析外,还可定量分析检测细胞增殖标志物、细胞表面标志、癌基因蛋白产物、耐药蛋白及细胞凋亡等,均可获得组织形态学方法难以得到的信息,为肿瘤的临床诊断、治疗和预防提供帮助。
在血液学研究中,应用流式细胞术除了用于白血病及淋巴瘤的免疫分型之外,还能进行血小板记数、血小板自身抗体测定、血小板膜表面糖蛋白分析及血小板活化分析等。
将流式细胞术与生物芯片技术有机结合,把不同生物探针(核酸和蛋白等)标记在各种有荧光的微球上,以荧光标记微球作为反应载体在液相系统中完成生物学反应,即为流式细胞术液相芯片技术。
它组成由荧光微球体―探针―目的分子―报告分子的反应模式,可以在同一液相中同时检测多个目的分子。
在组织化学和免疫组织化学中,流式细胞术可以对不同表型的细胞进行分类计数,以达到对某种细胞定量检测的目的。这一功能是利用流式细胞术能同时检测细胞的多种荧光信号,对不同荧光信号的细胞进行分类计数,获得含有不同化学物质的细胞群体信息的特点。