细胞膜渗透性实验原理与操作步骤

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本实验以鸡血为材料，将红细胞放置到不同的溶质溶液中，通过引起红细胞溶血时间不同，初步了解不同溶质进入细胞膜 的速度情况，具体步骤如下：

一、实验目的：

了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。

二、实验原理：

将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，引起溶血。由于溶质透入速度互不相同，因此溶血时间也不相同。

三、实验用品：

1. 器材：

试管，试管架，载玻片，盖玻片，显微镜，吸管，离心机 。

2. 试剂：

0.85%NaCl溶液，0.085%NaCl溶液，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L丙三醇，0.6%葡萄糖溶液，2% Triton X-100。

3. 材料：

鸡血。

四、实验步骤：

1. 取鸡血2~3mL，加0.85%NaCl溶液4mL，在1000r/min条件下离心5min。(红细胞压积量不少于0.3mL，否则应补加鸡血)

2. 将上述离心的红细胞按沉淀量配成50%浓度。(总体积量应不少于0.6mL)

3. 取6支试管，分别加入如下溶液各3mL

① 0.85%NaCl溶液;②0.085%NaCl溶液;③0.32mol/L甲醇;④0.32mol/L丙三醇;⑤6%葡萄糖溶液;⑥10% Triton X-100。

4. 向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，轻松混匀，观察个试管是否有溶血现象发生(观察时间1h)，记录溶血时间并于显微镜下观察溶液中细胞。

五、实验结果：

1. 鸡血红细胞在不同溶液下的溶血现象。

表1 鸡血红细胞在不同溶液下的溶血现象

编号
①0.85%NaCl溶液
②0.085%NaCl溶液
③0.32mol/L甲醇
④0.32mol/L丙三醇
⑤6%葡萄糖溶液
⑥10% Triton X-100			Triton X-100能去除细胞膜上的蛋白质，故能在较短时间内使细胞发生溶血

1. 对于溶血较快的试管，用显微镜观察时要注意滴加血液后立即镜检，否则将会因为细胞溶血太快而看不到细胞。

2. 即使细胞在等渗溶液中短时间内未发生溶血现象，但是细胞长时间处于等渗溶液中也会发生溶血现象。

3. 发生溶血的细胞从形态上看，膜结构上有一个个口，膜还是有结构的，但是细胞比正常细胞小。

注意事项：溶血较快的溶质，一定要掌握镜检时间;虽然是等渗溶液中，但由于细胞中某一物质离子数高于细胞，部分物质还是要进入细胞，最好发生溶血现象。