基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
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高速离心机，1.5 ml Ep管，涡旋器，超净台，基因枪，气瓶，激光共聚焦显微镜
撕取洋葱内表皮，置于高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇)中，室温100 rpm处理4 hours；然后转入高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar)。
a. 称取60 mg金粉放入1.5 ml Ep管(最好为烷硅化的进口管，减少金粉沾壁)；
c. 冰上静置5 min后，10，000 rpm离心1 min，去上清；
f. 加入1 ml无菌去离子水，涡旋振荡1-2 min，冰上静置5 min；
i. 加入1 ml无菌去离子水，按50ul每份分装到己灭菌的1.5-ml Ep管中备用(分装时应在无菌条件下边涡旋振荡，以保证分装均匀)
(注：以10枪/3 mg计算，具体实验可按比例进行换算，无水乙醇清洗处理好的金粉可继续用无水乙醇中-20℃长时间保存，实验中金粉沾壁时，最好用超声波处理，不进行无菌培养的材料可以不需要严格的无菌操作)
a. 取50ul金粉悬浮液(已分装好)，在连续涡旋振荡下按顺序加入
c. 室温下离心10，000 rpm 10 sec，尽可能去净上清；
e. 室温下离心10，000 rpm 10 sec，尽可能去净上清；
b. 载体膜、可裂膜、阻拦网等事先置于70%乙醇中1 min，灭菌滤纸上自然风干；将气瓶调节压力到1300psi；
c. 取8-9ul已用DNA包裹好的微粒悬浮液加到微粒载体膜中央，稍微晾干后马上进行轰击；
d. 将可裂膜、阻拦网、涂有微粒载体膜安装进固体装置中，射击参数为：轰击微粒运行距离为12cm，压力1110psi，真空度25mmHg；
