高分子物质溶解用于细胞实验的方法

【求助】高分子物质如何溶解用于细胞实验？

参与者：lihai584

我做的实验是考察一种高分子物质对细胞的作用，现在碰到的一个问题是用什么来溶解这种高分子物质。看到别人考察某种药物对细胞的作用，通常选用的方法是用培养基溶解药物，然后和细胞共孵育；我选用的那种物质水溶性很好，但是由于是高分子多糖，所以在预定的浓度下黏度很大。

现在用流式细胞仪进行检测，这个难点更加突出。

方案一：细胞培养，加入高分子物质溶液，共孵育后酶消化，荧光燃料染色，流式细胞上机。缺点是无法考证流式结果的差异是否来自酶消化还是来自高分子物质的加入

方案二：细胞培养，酶消化成单细胞悬液，加入高分子物质溶液共孵育，荧光燃料染色，流式细胞上机。基本可以排除酶消化的影响，但是由于黏度问题，物质无法和细胞很好接触并作用于细胞。

请问大家这种情况应该怎么办呢？

检测方案没有定下来，细胞都还没有开始培养，恳求高手指点啊，谢谢！

参与者：zhaoyueshui

试一下无水乙醇或DMSO

参与者：lihai584

无水乙醇或者DMSO是不是对细胞会有影响呢？

参与者：zhaoyueshui

如果只用几微升的话，应该没问题.当然最好对照也加相应体积的无水乙醇或者DMSO作对照

参与者：fishbody

能水溶还愁啥子，能水溶就不用DMSO了。如果稠，就先稀释一定倍数再加，甘油、吐温不都这样吗？

“方案一：细胞培养，加入高分子物质溶液，共孵育后酶消化，荧光燃料染色，流式细胞上机。缺点是无法考证流式结果的差异是否来自酶消化还是来自高分子物质的加入”

答：做一个不加药物的对照就可解决你的这个问题了。

“方案二：细胞培养，酶消化成单细胞悬液，加入高分子物质溶液共孵育，荧光燃料染色，流式细胞上机。基本可以排除酶消化的影响，但是由于黏度问题，物质无法和细胞很好接触并作用于细胞。”

答：只有当细胞处于贴壁状态时其生理状态才是正常的（对于贴壁细胞），若消化成悬液，则不能正常反映药物对细胞的作用了。所以一般都要在细胞贴后才加药物的。可你却想反其道而行？

因此，建议你采取方案1，当然对照组是不能少的。