【实验技巧】丽春红染色

丽春红（Ponceau S）染色是 WB 实验中的一个重要环节，今天就来给大家详解丽春红染色的作用和操作方法。

丽春红染色作用

可用于 PVDF 膜，硝酸纤维素膜和和醋酸纤维素膜上的蛋白的检测。

丽春红染色原理

丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。

丽春红特性

丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS 或其它适当溶液洗去。

为什么要用丽春红染色？

通过丽春红染色可验证转膜效率，及每孔上样蛋白总量是否均等，可以帮助后续实验进行内参调整或问题分析。

特别说明：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白检测。

操作方法

1. 将转印膜浸没在丽春红染色液中，用摇床孵育转印膜 1-30 分钟。

2. 取出转印膜，用去离子水冲洗膜直到背景干净（通常不超过 5 分钟），条带清晰，记录结果。染液可以继续用去离子水洗涤完全去除丽春红，进行后续的 WB 检测。

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