【实验技巧】台盼蓝染色

台盼蓝

是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性，检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。

机理

正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡，这与中性红作用相反。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

操作方法

1. 将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；

2. 细胞悬液加新鲜配制的台盼蓝染液，室温下染 3—5 min；

3. 染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；

4. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；

5. 计数活细胞和死细胞数目；

6. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。

（细胞活率 = 未染色的细胞数/观察的细胞总数×100%）

注意事项

1. 此方法可以用于胞质胞核分离实验中，检测细胞是否充分裂解。

2. 台盼蓝染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染上颜色，使监测结果偏低。

3. 另可结合细胞计数方法，同时进行细胞计数和活力检测。

4. 台盼蓝有潜在致癌危险，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。