细胞计数的多种方法
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血细胞计数器(也被拼写血球计数仪)是一种蚀刻玻璃室提出双方将举行石英盖玻片完全室地板0.1毫米以上。为9毫米2的总表面积的计数室中进行蚀刻。
![](https://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/01/A1359009266_small.jpg)
图1、 血细胞计数器的尺寸。
浓度的计算是根据上下方的盖玻片的体积。一个大广场(参见图2中的W)拥有量为0.0001毫升(长x宽x高,也就是说,0.1厘米×0.1厘米×0.01厘米)。
在这两种方法中,通过毛细管作用填充血细胞计数器 - 放置填充的吸移管具有良好的悬吊在血细胞计数器的边缘的凹口的细胞混合,然后慢慢地排出一些内容,以便通过毛细作用进入腔室fluidis绘制。
染色的细胞往往有利于可视化和计数。无论是混合细胞用台盼蓝(trypan blue)等体积的[0.4%(重量/体积)tyrypan蓝色在PBS]来确定活/死计数(死细胞是蓝色的),或杀死细胞,用10%福尔马林,然后染色用台盼蓝(trypan blue)或其他染色(以提高所有单元格的可视化。
这里有两个简单的方法,用于计数的基础上用于确定细胞计数的血细胞计数器的表面面积的细胞。其他的计数计划accetable的的。方法的选择取决于细胞浓度 - 该程序的准确性取决于计数细胞的数目。当细胞浓度低,应该算更多的网格。
方法A
计数的细胞数量在4个外广场(参见图2左侧面板)。
将细胞浓度计算如下:
细胞浓度每毫升细胞总数在4平方×2500×稀释因子
实施例:如果一个计数稀释后的细胞悬浮液的等分试样1时一十450细胞,原始细胞浓度= 450×2500×10 = 11,250,000 /毫升
方法B的
估计细胞浓度计数在大广场中间5格(参见图2右侧面板中)。
将细胞浓度计算如下:
细胞浓度每毫升细胞总数在5平方×50 000×稀释因子
实施例:如果一个数45细胞,稀释后的细胞悬浮液的等分试样1点10,原始细胞浓度= 45×50 000×10 = 22 500 000 /毫升
![](https://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/01/A1359009267_small.jpg)
图2、 计算方法程序A(左图)和B(右图)。