合作专家 | 黄玥琳博士
生理学 大连医科大学
原理
通过向动物快速腹腔注射水导致血清低钠血症,从而产生渗透压,促进水进入大脑。注入的水在不破坏血脑屏障的情况下产生细胞(细胞毒性)水肿。
用途
构建急性水中毒模型、观察脑水肿等。
材料与仪器
DDAVP(去氨加压素),蒸馏水,无菌注射器,动物体重秤。
步骤
1.动物称重,记录不同分组动物体重。
2.准备 DDAVP(0.4 μg/kg),蒸馏水稀释,按照动物体重 20% 腹腔给药。
3.为了分析发病率,连续观察小鼠,并使用 100 分神经功能缺损量表进行评估,分数为 0 表示正常,100 表示脑死亡,在前 30 分钟每隔 10 分钟评估一次,然后在接下来的 60 分钟每隔 15 分钟评估一次。
该量表评估了一般行为缺陷(40 分:尝试探索(0);没有尝试探索(20);正常呼吸(0);呼吸异常(20))。
颅神经反射(20 分:嗅觉,有(0),无(4);视力,存在(0),不存在(4);角膜,存在(0),不存在(4);胡须运动,存在(0),不存在(4);听觉,存在(0),不存在(4)) 。
运动障碍(20 分:腿部尾部运动,正常(0),僵硬(5),瘫痪(10))。
感觉缺陷(10 分:痛觉消失,存在(0分),不存在(10分))和协调能力缺陷(20分:存在(0分),不存在(5 分);肢体放置试验,有(0),无(5);翻正反射,存在(0),不存在(5);停止在平面的边缘,存在(0),不存在(5))。
在 90 分钟的观察期内评估神经功能缺损和结果后,将小鼠放回笼中,并在接下来的 4 小时中每隔 1 小时检查一次,直到恢复正常。
图片引自:Manley GT, Fujimura M, Ma T, Noshita N, Filiz F, Bollen AW, Chan P, Verkman AS. Aquaporin-4 deletion in mice reduces brain edema after acute water intoxication and ischemic stroke. Nat Med. 2000 Feb;6(2):159-63. doi: 10.1038/72256. PMID: 10655103.
注意事项
1、腹腔注射注意不要将针扎到动物腹腔脏器中。
2、严格按照体重给药。
常见问题
为什么注射后动物皮肤鼓包了?
答:这种情况是针头没有扎进腹腔中,而是扎到了皮下,扎进腹腔时有一种镂空感,之后需回抽注射器保证无血液抽出即没有扎进脏器内。
来源:丁香实验