人类免疫缺陷病毒标本采集及处理方法

艾滋病检测最常用的标本是血液，包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试样品。标本采集和处理参照《全国艾滋病检测技术规范（2009年版）》。

人类免疫缺陷病毒标本采集及处理方法的基本原理是 HIV 感染的诊断是以实验室检查为基础，结合临床表现和参考流行病学资料综合进行。实验室检查需根据检测目的和检测项目不同，采集不同标本种类。

器材：真空采血管或一次性注射器、采血针、离心机等。

人类免疫缺陷病毒标本采集及处理方法的基本过程可分为如下几步：

（一）标本采集

A 血液

① 静脉血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（或未加抗凝剂）的真空采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂（或未加抗凝剂）的试管中，轻轻颠倒混匀 6~8 次，备用；

②末梢血（通常为指尖血）：消毒局部皮肤（成人和 1 岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指或示指。1 岁以下儿童采用足跟部）。用采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。收集滴出的血液，备用。

B 尿液

使用清洁的容器收集尿液。女性应避开月经期。尿液样品可以在 2~8 ℃ 存放。

C 唾液

使用检测试剂盒提供的容器收集唾液样品。

（二）标本处理

用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在 4~8 小时内分离 PBMC 和血浆，否则应在 24~48 小时内分离血浆和血细胞。

A 血浆：将采集的抗凝全血 1500~3000 r/min 离心 15 分钟，上层即为血浆，吸出置于合适的容器中，备用。

B 血清：根据需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取 5~10 ml 静脉血，室温下自然放置 1~2 小时，待血液凝固、血块收缩后再用 1500~3000 r/min 离心 15 分钟，吸出血清，置于合适的容器中，备用。

C 淋巴细胞富集液：将采集的抗凝全血 1500~3000 r/min 离心 15 分钟，吸取血浆层下的淋巴细胞富集液，置于合适的容器中，备用。

D PBMC：使用淋巴细胞分离液，进行密度梯度离心，吸出 PBMC 层，备用。

1 采样时间：采集抗凝全血用于 CD4⁺ T 淋巴细胞测定时，由于 CD4⁺ T 淋巴细胞数存在日间自然变化的个体差异，每一患者采样时间应尽可能集中在某个相同的时段。如：每次采样时间均在上午或均在下午。

2 采集要求：采样前要检查所需物品是否已备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致，并注明样品采集时间。

抽取静脉血液（或以其他方式收集血液样品）时要注意安全，应使用一次性注射器或一次性真空采血管，采血部位要严格消毒，戴手套，谨慎操作，防止刺伤皮肤和造成外界环境污染。不在现场检测的样品，通常采集 5 ml 静脉血，现场分离血清或血浆后直接送到相关的检测点或筛查实验室。

采血完成后的穿刺针头必须丢弃于尖锐危险品容器里，妥善处理，防止发生职业暴露，遵守生物安全要求。

3 样品的保存：① 用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于 - 20 ℃ 以下，短期（1 周）内进行检测的样品可存放于 2~8 ℃；② 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于 - 20 ℃ 以下，进行病毒 RNA 检测的样品如需保存 3 个月以上应置于 - 80 ℃；③ 用于 CD4⁺/CD8⁺ T 淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过 48 小时则不可检测。

4 标本的包装与运送：实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。标本运送时应采用三层容器进行包装，随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息，并应放置在第二层和第三层容器之间。样品的运送应符合生物安全要求，要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送。