简介
可溶性糖多是带有甜味的一些糖,如葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等。可溶性糖含 量是果实品质的一项重要指标,果实成熟过程中可溶性糖含量增加。可溶性糖也是植物细胞 渗透调节物质之一,干旱条件下植物组织中可溶性糖含量增加。测定可溶性糖含量可用于分 析果实品质,了解植物的生理状况。本实验目的在于掌握蔥酮比色法测定可溶性糖含量的原 理和方法。
原理
植物组织中可溶性糖含量的测定的基本原理是糖(sugar)在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛,生成的糠醛 或羟甲基糠醛与蔥酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色,其吸收峰为625 nmo在一定 范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比, 故可用于糖的定量测定。
材料与仪器
材料:各种植物组织,如根、茎、叶、果实、种子等。
器材:分光光度计,天平,水浴锅,离心机或漏斗,具塞刻度试管,容量瓶,移液管等。
试剂:
①80% 乙醇
②100μg·mL-1标准葡萄糖溶液:准确称取烘干至恒重的葡萄糖 100 mg, 用 80% 乙醇溶解后定容至1 000 mL
③蔥酮试剂:称取蔥酮0.1 g溶于100 mL硫酸溶液(将76 mL相对密度为1.84的浓硫酸用蒸馅水稀释到100 mL), 贮于棕色瓶,当日配制使用。
步骤
试剂 | 试管编号 | ||||||
0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
标准葡萄糖溶液/mL | 0 | 0.1 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
蒸榴水/mL | 1.0 | 0.9 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 | 0 |
蔗糖浓度/(ptg・mL'1 ) | 0 | 10 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
蔥酮试剂/mL | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
注意事项
1. 提取可溶性糖所剩残渣放在 80°C 烘箱中烘干,可用于测定淀粉和纤维素。
2. 由于蔥酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化,故必须在反应后立即在同一时间比色。
来源:丁香实验