简介
免疫介导法,是 BALB/c 小鼠经业致死量照射后,机体的免疫功能严重受损,再输入同基因 H-2,但 MIs 抗原不同的 DBA/2 小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞,在宿主体内生存,使宿主体内出现造血抑制细胞和血浆 CFU-GM 抑制活性,从而导致造血干细胞数量明显减少并出现缺陷,使自身复制的速率低于分化率,最终引起全血细胞减少。
原理
免疫介导法的基本原理是机体造血系统病理改变、产生类似临床血虚证候,造成小鼠血虚动物模型。
材料与仪器
动物:
BALB/c 小鼠、DBA/2 小鼠。
器材:
医用手术器械一套。
步骤
免疫介导法的实验步骤如下:
A、取 DBA/2 小鼠断领处死,95% 乙醇浸泡消毒 5 分钟后,无菌条件下取出胸腺及颈、腋下、腹股沟淋巴结,加 RIPMI 1640 培养液,除去表面血污及黏附的结缔组织,再次清洗。
B、用手术刀、剪刀反复剪切组织,直至成糊状,再轻轻辗碎,用 200 目尼龙网过滤,使之成为单细胞悬液,计数后配成 1 × 106/ml 浓度,其胸腺细胞:淋巴细胞 = 1:2。
C、取 1 滴台盼蓝滴入玻片上,鉴定细胞活性应在 95% 以上。BALB/c 小鼠经 X 射线 20 Gy/3 min 亚致死剂量照射后,立即经尾静脉注入上述细胞悬液,每只小鼠 0.2 ml。
来源:丁香实验