腹腔内重复使用脂多糖诱导早产模型

最新修订时间：2022-02-10

简介

腹腔内重复使用脂多糖诱导早产是指脂多糖可与细胞表面 Toll 样受体（Toll-like receptor, TLR）相互作用，激活下游的信号传导介质，引起细胞因子和趋化因子等发生一系列变化，促进宫颈成熟、使静息状态的子宫发生节律性收缩状态，最终发生早产。

用途

该模型多用于研究细菌产物致早产的非特异性全身反应以及药物疗效的评价。

材料与仪器

实验动物：

发情雌性小鼠（如 C₃H/HeN、C57BL/6 等）与雄性小鼠（如 B6D2F1）。

步骤

腹腔内重复使用脂多糖诱导早产的基本过程可分为如下几步：

A. 动物准备：6～8 周龄雌性小鼠（如 CD-1 小鼠）经阴道涂片检查以确定其动情期，将雌性小鼠在动情期与雄性（CD-1）小鼠放置在一起，以阴道出现阴道栓或精子作为妊娠的标志，于妊娠 d15 施行手术接种细菌。

B. 细菌悬浮液的准备：以大肠埃希菌（E.Coli）为例，将 E.Coli 菌株悬浮于液体培养基中，37 ℃ 培养一夜，分装后冷冻备用。实验前将其解冻，37 ℃ 培养一夜，用培养液稀释成（2～10）x 10⁴/ml 作为最终接种的细菌浓度。培养和稀释细菌均采用 LB 培养基。准备好的细菌悬液在 3 小时内使用。

C. 发情雌性小鼠（如 C₃H/HeN、C57BL/6 等）与雄性小鼠（如 B6D2F1）交配后，干妊娠 d15～d17 接受脂多糖处理。小鼠腹部消毒，将脂多糖用生理盐水溶解后，以每次 50 μg/kg（100 μl）的剂量注入小鼠腹腔，间隔 3 小时后再注射 1 次。一般选择 1 4 时和 17 时两个时间点。以后每天早晨和下午观察动物的分娩情况，记录分娩时间。接种后 48 小时内分娩或小于妊娠 19 天分娩者为早产。

注意事项

该模型可能因剂量和动物本身的原因，部分受试动物可出现休克和死亡，致使模型的重复性和可信度差。因此，制作此模型时应注意采用合理的剂量及应采用的动物品系。重复小剂量应用可避免上述缺陷，可获得 100% 的早产而不引|起动物死亡。

来源：丁香实验