简介
矽肺动物模型的建立主要是对动物双侧肺注入石英粉悬液引起动物形成矽肺。
原理
SiO2 尘粒吸入肺泡后被肺巨噬细胞吞噬(尘细胞),含有矽尘的吞噬小体与溶酶体合并成为次级溶酶体。SiO2 对巨噬细胞有明显毒性作用,石英表面的羟基与溶酶体膜的磷脂或蛋白形成氢键、导致吞噬细胞溶酶体崩解,最后细胞膜本身也被破坏,矽尘释出,后又被其他巨噬细胞吞噬,如此反复进行。受损或已破坏的巨噬细胞释放「致纤维化因子」,并激活成纤维细胞,导致胶原纤维增生,形成纤维化。
材料与仪器
器材:注射器、常用手术器材、显微镜
试剂:
① 生理盐水
② 乌拉坦
③ 苯扎溴铵
步骤
矽肺动物模型的建立过程一般有以下几步:
A. 选用体重 2~3 kg 家兔,将乌拉坦用生理盐水配制成浓度为 20% 的溶液,按 5 ml/kg 剂量腹腔注射,对家兔进行麻醉,至家兔四肢肌肉松弛,角膜反射消失。
B. 将麻醉的家兔平放在兔台上,仰卧,固定上、下肢、用苯扎溴铵沾湿颈部皮毛,进行局部剪毛。
C. 按120 mg/kg 用标准石英粉(含颗粒直径小于 5 μm 的 SiO2 > 95%) 做成浓度 40 mg/ml 悬液,经环甲膜分 2 次注入双侧肺内。
D. 家兔在 2 个月时,肺内可观察到有矽结节形成,矽结节多沿肺门大支气管分布,实质内亦有少部分矽结节形成,此时矽结节 HE 染色多嗜蓝染,主要由巨噬细胞、噬尘细胞、淋巴细胞和组织嗜碱性粒细胞组成。
E. 4 个月时,矽结节 HE 染色红蓝染,主要由巨噬细胞、成纤维细胞和纤维细胞组成,可见少扯胶原纤维生成。
F. 6 个月时,矽结节中央可见胶原纤维,周围肺组织可见气肿表现。
G. 随行染尘时间的延长,家兔肺组织内矽结节的数量明显增加,表明随着染尘时间的延长,肺组织内纤维化程度不断增加。
来源:丁香实验