尾静脉注射法制备肺结核动物模型
别名：Animal models of pulmonary tuberculosis
最新修订时间：
简介
结核分枝杆菌在体内感染后通常会引起机体组织的渗出、坏死或增生 3 种病理变化，并根据机体的反应性（包括免疫反应和变态反应）、菌量、毒力及组织特性的不同，可出现不同类型的病理变化。
材料与仪器
器材：培养箱、注射器、显微镜
试剂：
① 0.05％ 吐温 80 生理盐水
② 改良罗氏培养基
步骤
尾静脉注射法制备肺结核动物模型的造模实验基本过程有以下几步：
A. 选取 C57BL/6 小鼠， 6~8 周龄，体重（18 ± 2）g。
B. 将经过小鼠体内毒力复苏的 H37Rv 标准毒株，转种于改良罗氏培养基上， 37 ℃ 保湿培养 20 天。
C. 刮取生长良好的干菌落研磨，加入 0.05％ 的吐温 80 生理盐水研磨成 1 mg/ml 的细菌悬液，每毫升悬液含 H37Rv 约 1×107 cfu 活菌。
D. 菌液接种于罗氏培养基上用于浓度确定，培养 20 天后确定菌液浓度为 1 × 107 cfu/ml 。
E. 取 0.2 ml 菌液经尾静脉注射小鼠。
F. 第 3 周时，可见感染程度不同的病理变化，大多数肺泡腔内充满以中性粒细胞为主的炎性渗出物和坏死组织，病灶中心可见明显干酪样坏死，部分可见肺水肿、肺气肿，病变累及约2/3 左右肺组织。
G. 第 6 周时，可见到大、中、小结核结节及片状融合性病灶，有干酪样坏死及肺水肿，病变范围多在 2/3 以上。
H. 第 9 周时，尾静脉感染组多见片状融合性结核病灶及一定量肺泡巨噬细胞增生病变，范围达3/4 左右。
I. 抗酸染色后，在镜下可见不同数队的结核分枝杆菌呈阳性。
来源：丁香实验
