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脂多糖(内毒素)法制备慢性支气管炎动物模型

别名:Animal models of chronic bronchitis

最新修订时间:

简介

脂多糖气管注入法是目前常用的造模方法。脂多糖气管注入法造模机制是通过脂多糖致急性肺损伤的模型改良而来,脂多糖用量稍大就会出现急性肺损伤,且不能模仿致病因素慢性刺激引起的慢性支气管炎,故应通过少量、多次的方式给予脂多糖。

原理

脂多糖是革兰阴性菌的细胞壁最外层结构,是类脂质、多糖和蛋白质的复合物,即内毒素,它在体内可引起多种生物学效应。受到脂多糖刺激后,不仅肺泡巨噬细胞过度激活,炎症介质异常释放,导致过度炎症反应及自身组织破坏,增加 NO 的分泌,从而诱发慢支并加重炎症反应。

用途

吸烟和气管支气管感染在慢性支气管炎病理生理中起重要作用,许多炎症细胞因子和介质与慢性支气管炎肺结构重塑有关。感染作为慢性支气管炎的病因之一,脂多糖较好地实现了感染对气管、支气管的影响,目前脂多糖法仍有待深入,较少应用于药物疗效的评价。

材料与仪器

器材:注射器

试剂:

① 脂多糖

② 弹性蛋白酶抑制剂

③ 内毒素

步骤

脂多糖(内毒素)法制备慢性支气管炎动物模型的造模实验步骤有以下几步:


(一)大鼠制备方法


A. 气管内滴注脂多糖 1 mg/kg 可复制急性肺损伤模型,出现富含蛋白、纤维蛋白的肺泡分泌液和弥漫性中性粒细胞肺泡炎。

B. 脂多糖可引起相似于慢性支气管炎的气道病变,F344 大鼠每只鼻内滴注脂多糖 500 μg (约 2.5 mg/kg), 1 次/天,连续 3 天,或吸入内毒素 0.3 μg/ml, 3 h/d, 连续 3 天。

C. 发生主气道上皮内中性粒细胞渗透、分泌细胞增生和上皮内黏液物质显著增加。

D. 黏液细胞化生的特点是细胞内移入更多的酸性黏液物质,末次滴注后 1 天上皮内黏液物质量增加最为显著。

E. 大鼠显示急性支气管肺炎,1 周后虽支气管肺炎已恢复,但上皮内黏液物质量持续增加。

(二)仓鼠制备方法


A. 仓鼠气管内滴注内毒素 500 μg,2 次/周,连续 3.5~5 周。

B. 肺内大气道黏液细胞数量增加,并发生肺气肿。

C. 如同时滴注弹性蛋白酶抑制剂可使肺气肿和黏液细胞化生减少,提示气管内滴注内毒素引起的中性粒细胞聚集和源自中性粒细胞的产物弹性蛋白酶能导致黏液细胞化生和肺气肿。

注意事项

通过多次简易给予脂多糖可模仿慢性炎症刺激,又不至于出现一次性大剂量脂多糖引起急性肺损伤。并且操作简单、污染少、易定量。

来源:丁香实验

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