转基因致 Graves 病动物模型

转基因致 Graves 病动物模型，是用转基因方法建立永久的 Graves 病动物模型，在以上谈及的各种方法中，虽然实验小鼠出现不同程度的甲亢表现，但这种免疫应答是暂时性的．所产生的 TSAb 都是针对外来 TSHR。为了克服上述问题．转基因方法被用于建立 Graves 病动物模型 。

转基因致 Graves 病动物模型的基本原理是用转基因方法建立永久的 Graves 病动物模型。

转基因致 Graves 病动物模型可用于普遍意义上的 Graves 病的研究。

器材：

病毒转染、提 RNA、逆转录、PCR、显微注射相关器材。

试剂：

①GD 患者的外周血 ;

②EB 病毒;

转基因致 Graves 病动物模型的基本过程可分为如下几步：

A. 从 GD 患者的外周血中提取表达 TSAb 细胞克隆 B687, EB 病毒转染 B 细胞，使其永生化后，从中分离出 TSAb 重链 (H) 和轻链 (L) 可变区 (V) 的 cDNA 。

B. 经过 PCR 扩增，依次连接 5.7 kB 的轻链、 3.7kB5' 非编码区的 VDJ 片段和 4.7 kB 的重链。 在此片段上游 500 bp 处加入 ATG 启动密码子，同时还包括一些增强子及附件。

C.14 .1 kB 的片段微注射入 C57BU6J 小鼠的受精卵中，观测时间设定在小鼠出生后 12-20 周。