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核酸免疫法致 Graves 病动物模型

相关实验:Graves 病动物模型

最新修订时间:

简介

核酸免疫法致 Graves 病动物模型,是通过重组表达载体的方式构建模型。

原理

核酸免疫法致 Graves 病动物模型的基本原理是通过构建原核或真核表达载体,将编码目的抗原 TSHR 基因以重组表达载体的形式,经各种基因转移途径转入机体细胞,借用宿主细胞的表达加 工机构合成抗原,以 MHC2Ⅰ 和(或)MHC2Ⅱ 类分子抗原处理和输送途径将抗原信息呈递 T 淋巴细胞,从而激发体液免疫和细胞免疫。

用途

核酸免疫法致 Graves 病动物模型可用于普遍意义上 Graves 病的研究。

材料与仪器

器材:


构建基因表达载体相关器材。


试剂:


①真核表达载体或腺病毒载体 ;


②TSHR cDNA 。

步骤

核酸免疫法致 Graves 病动物模型的基本过程可分为如下几步:


A. 将 TSHR cDNA 克隆到某真核表达载体中,将载体注射到动物体内,通常采用腹腔注射或肌内注射方式,载体感染宿主细胞后,在宿主细胞表面表达 cDNA 编码的蛋白。


B. 近年来,随着腺病毒载体不断改进完善,以其装载容量大、可在宿主细胞中大量增殖等特点,被广泛用于科学研究。 Nagayama 等构建了编码 TSHR 全长的腺病毒载体,肌注 BALB/c (H-2d)、 C57BL/6 (H-2b)、 CBA/J (H-2k) 、DBA/1J(H-2q) 和 SJL/J (H-2 ) 品系的小鼠,每隔 3 周免疫 1 次,共免疫 3 次。8 周后监测发现, 5% 雌性、 33% 的雄性 BALB/c 和 C57BL/6 小鼠的血清 T4 、TSⅠ、TBⅡ 水平升高。

来源:丁香实验

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