多发性脑血栓动物模型

多发性脑血栓动物模型，是采用复合血栓诱导剂诱导大鼠多发性脑血栓形成方法制模。

多发性脑血栓动物模型的基本原理是采用复合血栓诱导剂诱导大鼠多发性脑血栓形成方法制模。血栓形成经多种途径产生，其中以血小板聚集，血管壁损伤和收缩，血液凝固系统启动等因素占主导地位。 本法采用 ADP 、凝血酶和肾上腺素复合血栓诱导剂制备大鼠脑血栓模型，从病因病理上符合血栓形成的复杂过程。在此 3 种成分中， ADP 为天然血小板聚集剂， ADP 使血小板内储 Ca2+释放，与钙调蛋白结合，促进血小板产生脱颗粒反应，释放活性物质， Ca²⁺ 激活磷脂酶 A2，而促进内源性花生四烯酸 (AA) 释放，促进血栓素 A2 (TXA2) 的合成 凝血酶可使纤维蛋白原转变成纤维蛋白，加速疑血过程；同时能激活磷脂酶 C, 进』步促进 Ca2+ 释放。肾上腺素促进血管收缩，增强 ADP 疑血酶对血小板的激活作用。三者合用产生协同作用，采用此种复合血栓诱导剂能更好地模拟血栓形成的病理过程。

多发性脑血栓动物模型可用于多发性脑血栓形成机制研究、防治脑血栓措施和药物疗效评价的实验研究。

器材：

手术器械、头皮针等。

试剂：

①戊巴比妥钠;

②复合血栓诱导剂（含 ADP 12.5 moll/L, 凝血酶 1.25 U/mL, 肾上腺素 1 mg/mL； 按 100: 200: 5 比例混合均匀，可, 现配、冰箱保存）；

③0.2% 伊文思蓝 ；

④0.5% Na₂SO₄；

多发性脑血栓动物模型的基本过程可分为如下几步：

选用 SD 大鼠，雌雄不限，体币为 250-350 g， 戊巴比妥钠 40-50 mg/kg 腹腔注射麻醉，仰位固定，手术分离右侧颈总动脉和颈外动脉、夹闭颈总动脉近心端、暂时结扎颈外动脉，用头皮针向颈总动脉头端注射复合血栓诱导剂（含 ADP 12.5 moll/L, 凝血酶 1.25 U/mL, 肾上腺素 1 mg/mL, 按 100: 200: 5 比例混合均匀，可, 现配、冰箱保存）0.1 mL/ 100 g 、注射用凝胶局部止血， 3-5 分钟后松开颈外动脉，缝合伤口， 观察指标：

1.伊文思蓝的通透性： 造模时，当血栓诱导剂注入 5 分钟后、注入 0.2% 伊文思蓝 0.5 mL/100 g, 再过 分钟后迅速断头，取两侧大脑半球、称重，加入 0.5% Na2SO4 3 mL 及丙酮 7 mL, 制成匀浆，密封，放置 60 分钟以上。3000 r/min 离心 10 分钟，取上清液，以生理盐水调零点，在 60 µm 处比色，以吸收度与脑重的比例表示伊文思蓝的含量。

2. 记录皮质脑电图：于造模前首先在枕颞部钻孔安装脑电极，准备描记皮质脑电图用。 缓慢推注血栓诱导剂，直到脑电频率减慢，振幅降低至给药前的 10%-20% 时，停止注射。

3. 测定血小板聚集性。

4. 测定 TXB2/6-keto-PGF1α：用放射免疫分析法测定血栓烷 B2 (TXB2) 6- 酮－前列腺素 F1α (6-kPIOPGF1α）在贫血小板血浆 (PPP) 中的含量。模型组 TXB2/6-kPLo-PGF1α 比值升高，如药物能使其比伯降低，则说明其有抗血栓形成作用。