简介
铜绿假单胞菌感染大鼠肺炎模型为构建铜绿假单胞菌慢性肺部感染模型。对于研究铜绿假单胞菌肺部感染的致病机制、抗生素耐药和疫苗开发具有重要价值。
原理
将 PA 包被的硅胶管置入大鼠一侧主支气管,28 天后处死大鼠分离肺组织, 进行病理学和细菌学检测。
用途
对于研究铜绿假单胞菌肺部感染的致病机制、抗生素耐药和疫苗开发具有重要价值。
材料与仪器
器材: SD 大鼠,(250 土 25)g
试剂:
① 1.5 x 109 efu/ml 菌液
② 50 g/L 盐酸氯胺酮注射液
步骤
铜绿假单胞菌感染大鼠肺炎模型的基本过程可分为如下几步:
A. 无菌硅胶管的包被: 将无菌硅胶管 (3 Fr, 直径 1.0 mm,长 3.0 mm) 置入 1.5 x 109 efu/ml 菌液中. 充分振荡使其沉入试管底部,置 37 ℃ 恒温箱 3 天。置管前计数管壁上的菌落数为 4.65 x 10' efu。
B. 模型构建﹑选用 7~9 周龄 SD 大鼠, 用 50 g/L 盐酸氯胺酮注射液以 2 mL/Akg, 腹腔麻醉后固定,张开大鼠口腔暴露会厌, 将含有硅胶管的静脉鞘管插入大鼠一侧主支气管, 用静脉导管内针将硅胶管推入支气管中、拔出静脉鞘管及静脉导管内针: 待大鼠苏醒后放入无菌笼中, 自由取食,每日观察进食. 毛发. 精神状态等一般情况。
注意事项
1. 硅胶管置入后 28 天,肺组织培养出野生型铜绿假单胞菌,匀浆菌落计数超过 103 cfu/g。大体病理表现为纤维增生, 肉芽肿形成, 镜下表现为淋巴细胞浸润为主的炎症反应。
2. 本实验选用的动物为 SD 大鼠。大鼠较之小鼠能更清晰地暴露会厌部,对铜绿假单胞菌感染的耐受性更强, 插管时缺氧耐受性好, 故置管的成功率较高, 成活率高。同时硅胶管对机体刺激性小,可以减少非特异性炎症反应。在感染过程中, 硅胶管于体内不会分解,在肺部大体观察时易于辨认,便于判断硅胶管是否被准确置于一侧支气管内。另外, 硅胶管比较容易获得, 成本不高。
来源:丁香实验