简介
隔离器污染微生物检测法，是将饮用水、粪便、隔离器表面和饲养动物体内收集到的标本进行培养，以监测是否存在污染物。必须小心采取标本，减少粪便样品暴露在空气中的时间，以确保厌氧细菌的生长。饲养在一个开放的隔离系统中的小鼠暴露于相同的微生物环境，因此从一个动物采集的标本应该代表了所有隔离器中的小鼠标本。
材料与仪器
器材：
培养皿、密闭无菌容器、解剖工具、Ⅱ级生物安全柜、培养箱等。
试剂：
①无刃天青的巯基乙酸液体培养基 ;
②5% 羊血的心脑浸液琼脂平板 ;
③沙氏琼脂培养基。
步骤
隔离器污染微生物检测法的基本过程可分为如下几步：
A. 将小鼠移出无菌隔离器，放入一个密封无菌容器，送到诊断实验室的Ⅱ级生物安全柜中进行无菌尸检。尸检时，新鲜的肝、肺、胃肠道内容物的样品可以进行无菌均质化及微生物测试；
B. 隔离器中动物的新鲜粪便或棉签标本应放入不加刃天青的巯基乙酸液体培养基中。需氧菌会在硫基乙酸培养基近表面生长也就是在培养基和空气的交界处，而厌氧菌会在缺乏氧气的培养皿底部生长；
C. 使用心脑浸液琼脂平板加入 5% 羊血，在需氧和厌氧条件下， 25 °C , 37 °C 和 55 °C 进行标本培养；
D. 沙氏琼脂培养基在 25 °C 条件下适合真菌的生长。
注意事项
1. 所选培养基应方便分离特定污染菌，或与实验小鼠研究相关的病原菌。
2. 所有在有氧和无氧的条件下分离培养的样品，在确定微生物增长之前应至少培养 5 天。污染菌的存在可能会掩盖目的菌，相反，污染菌过度生长可能会干扰分离目的微生物。
3. 耐热芽胞杆菌的存在表示对于饲料、床和其他用品的高压蒸汽灭菌不足。葡萄球菌属的存在意味着污染从手套破孔进入，或传输仓没有应用要求的冷消毒剂或接触时间不足。真菌或霉菌污染很少发生，通常可以追溯到传递桶的过滤膜或食品上。高压灭菌器的干燥循环设置必须进行检查，以保证下燥周期产生足够的时间让传递桶的过滤膜晾干，之后再从消毒器中拿出来。
来源：丁香实验
