简介
性别控制（sex pre-selection）技术是通过对动物的正常生殖过程进行人为干预，使成年雌性动物产出特定性别后代的一门生物技术。性别控制技术在畜牧生产中意义重大，通过控制后代的性别比例，可充分发挥受性别限制的生产性状（如泌乳）和受性别影响的生产性状（如生长速度、肉质等）的最大经济效益。其次，控制后代的性别比例可增加选种强度，加快育种进程。性别控制可以通过精子分离或胚胎性别鉴别来实现。
原理
控制动物性别的原理主要是基于动物雌雄生殖细胞，特别是动物精子的差异。高等动物的 X 精子与 Y 精子无论在形态结构、重量密度，表面膜电荷的电量分布及电性，还是精子的抗原免疫性、运动速度和活力以及耐酸碱性等方面都存在较大的差异。
材料与仪器
器材：
① 注射器
② 精子图像分析仪（ceros sperm analyer Hamilton Thorne research）
③ 流式细胞仪（Mo Flo SX，Dakocytomation Fort Collins，Co，USA）
④ 冷冻离心机（Eppendorf，5804R）
试剂：
① 材料：猪
② 精子稀释液：葡萄糖、枸橼酸钠、EDTA-Na、碳酸氢钠、BSA、HEPES 缓冲液、庆大霉素
③ 食物色素储备液（25 mg/ml，FD ＆ C40）
④ 绒毛膜促性腺激素（hCG）
步骤
猪性别控制的基本过程可分为如下几步：
1. 精液采集和处理
手握法采集公猪精液，尽快送回实验室。适度稀释（每 100 ml 稀释液含：葡萄糖 2.6 g，枸橼酸钠 0.8 g，EDTA-Na 20.24 g，碳酸氢钠 0.12 g，BSA 0.25 g．HEPES 缓冲液 0.9 g．庆大霉素 0.03 g，pH7.0 左右），使用精子图像分析仪检测精子活力等指标，使用血细胞计数器测定精子密度。再根据试验需要对精液（精子）进行不同处理。
2. 精子分离
（1）使用稀释液适当稀释精液（精子密度（0.8～1.2）x 10/ml）。
（2）每毫升稀释精液加入约 15 μl H2O（5 mg/ml 储备液），34 ℃ 水浴避光染色 0.5 小时后，加入 1 μl 食物色素储备液（25 mg/ml，FD ＆ C40）染色 3-5 分钟，使用 51 μm 孔径筛过滤，室温（20～23 ℃）保存。
（3）调好仪器后尽快（2～3 小时内）通过流式细胞仪进行分离。分离条件：鞘液（为加入 0.1％ BSA 和 0.1％ EDTA 的 PBS）压力 40 Psi，150 mW 激光、76 μm 内径的喷嘴，分离速度为 3000/s 左右。收集管中预先加入约 500 μl 接收液（加入 1％ 精浆和 2％ 卵黄的 TEST 液；精浆准备：全精液 3500 g 离心 15 分钟后，取上清液使用 0.22 μm 孔径筛过滤 2 次，取滤液检查无精子后备用），收集大约 1.0 x 10 个性别精子后，在 21 ℃，972 g 离心 15 分钟，沉淀用重悬浮液（加入 1％ 精浆的精液稀释液）重悬浮，室温（20～23 ℃）保存 1-3 小时，供输精用。经流式细胞仪重分析法测定精子分离纯度，并测定分离精子活力。
3. 分离精子授精产仔
（1）受体母猪的准备：陆续挑选确定发情 50～60 小时的经产母猪 4 头（3 头陆川母猪，1 头桂科 1 号母猪）接受手术授精。手术当天不喂饲料，但保证清洁卫生的饮水供应。选用同等陆川母猪采用常规人工授精作为对照。
（2）手术授精：在经过麻醉的母猪一侧肷部实施手术。暴露部分子宫、输卵管及宫管结合部，使用适当的一次性输液针、输液管配合注射器，在结合部输卵管一侧，沿腹壶方向将分离的精子重悬浮液（每侧输卵管大约 450 万精子，液体 0.5 ml 左右）注入输卵管中，然后放回腹腔，同样操作对侧输卵管，后缝合、处理创口。术后根据情况注射抗生素 3-5 天。进行日常管理，待产仔。
（3）产仔指标测定：统计母猪产仔头数（总产仔数、活仔数）和性别比例；观察仔猪初生、哺乳、断奶时期形体、活力、健康等状况，鉴定胚胎控制性别。
来源：丁香实验
