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小鼠尾部皮肤的表皮毛囊全标本(whole mount)的免疫荧光染色实验

相关实验:小鼠皮肤组织学分析实验

最新修订时间:

材料与仪器

器材:尖头镊、显微镜、表皮毛囊全标本等

试剂:

① 脱脂奶粉

② 曲通

③ 吐温

④ PBS 缓冲液

⑤ 甘油

步骤

小鼠尾部皮肤的表皮毛囊全标本(whole mount)的免疫荧光染色实验的基本过程可分为如下几步:

A. 将表皮毛囊全标本取出,放入封闭液(3% 脱脂奶粉,0.5% 曲通溶于 PBS),4 ℃ 过夜。

B. 加溶于封闭液的一抗,4 ℃ 过夜。

C. 用含 0.2% 吐温的 PBS 洗超过 4 次,每次 1 小时。每次洗的时候轻轻摇动。

D. 加溶于封闭液的二抗,4℃ 过夜。

E. 用含 0.2% 吐温的 PBS 洗超过 8 次,每次 0.5 小时。每次洗的时候轻轻摇动。

F. 50% 甘油封片,镜检。结果示例如图 8-11-3 所示。

注意事项

加入的液体以盖过标本为准,清洗时要洗干净,不然可能会导致背景深。

来源:丁香实验

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