材料与仪器
器材:尖头镊、显微镜、表皮毛囊全标本等
试剂:
① 脱脂奶粉
② 曲通
③ 吐温
④ PBS 缓冲液
⑤ 甘油
步骤
小鼠尾部皮肤的表皮毛囊全标本(whole mount)的免疫荧光染色实验的基本过程可分为如下几步:
A. 将表皮毛囊全标本取出,放入封闭液(3% 脱脂奶粉,0.5% 曲通溶于 PBS),4 ℃ 过夜。
B. 加溶于封闭液的一抗,4 ℃ 过夜。
C. 用含 0.2% 吐温的 PBS 洗超过 4 次,每次 1 小时。每次洗的时候轻轻摇动。
D. 加溶于封闭液的二抗,4℃ 过夜。
E. 用含 0.2% 吐温的 PBS 洗超过 8 次,每次 0.5 小时。每次洗的时候轻轻摇动。
F. 50% 甘油封片,镜检。结果示例如图 8-11-3 所示。
注意事项
加入的液体以盖过标本为准,清洗时要洗干净,不然可能会导致背景深。
来源:丁香实验