简介
卵母细胞体外成熟实验的目的是检测由卵巢中分离得到的处于前期 I 中的卵母细胞，在体外培养的条件下，是否能成熟并进行正常的减数分裂过程。同时也可以在开始培养后不同时间点观测卵母细胞体外成熟的变化。
材料与仪器
器材：
① 解剖器具
② 立体显微镜
③ 25 G 注射针头
④ 玻璃管
⑤ 二氧化碳培养箱
⑥ 培养基。
试剂：
① PMSG；
② M2 培养基；
③ M16 培养基。
步骤
卵母细胞体外成熟实验的基本过程可分为如下几步：
A 向未性成熟的 24 日龄小鼠注射 5 U 的 PMSG。
B 注射 PMSG 后 48 小时，将小鼠处死。取出卵巢（注射过 PMSG 后的卵巢相对于未注射的要膨大）置于 PBS，在解剖镜下剥去卵巢外的包膜。
C 转移卵巢至 M2 培养基中，使用 25 G 注射针刺破卵巢表面的卵泡，使其中的卵母细胞释放出来。挑选含有核膜的成熟卵母细胞，使用玻璃管吸出，转移至在二氧化碳培养箱中预热过的 M16 培养基中培养。
D 培养 1.5 小时后，显微镜下观察卵母细胞，正常情况下大部分卵母细胞将发生核膜破裂，细胞核消失。剔除没有发生核膜破裂的卵母细胞，其余发生核膜破裂的卵母细胞继续培养。
E 核膜破裂后 6 小时卵母细胞会到达减数分裂中期 I；核膜破裂 12～14 小时后卵母细胞会排出第一极体，停滞在减数裂中期 II。
F 根据实验需要选取时间点对体外培养的卵细胞进行固定和染色，观察染色体、微管等形态来判断减数分裂过程是否正常。
来源：丁香实验
