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卵母细胞冷冻保存技术慢速冷冻法

相关实验:卵母细胞冷冻保存技术

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简介

卵母细胞冷冻保存技术慢速冷冻法,与胚胎慢速冷冻法相似这种冷冻方法是一种平衡冷冻方法。

材料与仪器

器材:0.25 mL 细管、冷冻仪、液氮罐。

试剂:

① 甘油 ;
② PBS ;
③ PBSS(含 20% NCS 的 PBS)。

步骤

卵母细胞冷冻保存技术慢速冷冻法的基本过程可分为如下几步:

A. 将卵母细胞依次放入含 0. 7 mol/L 甘油的 PBS 和含 1.4 mol/L 甘油的 PBSS 中,分别平衡 7-10 分钟;

B. 然后将卵母细胞装入 0.25 mL 细管的中部,并在细管两端加入冷冻液,每端冷冻液和含有卵母细胞的中间段均用气泡隔开;

C. 将细管放入预先冷却至 -7 °C 的冷冻仪中平衡 10 分钟;

D. 以 0.1~1.0 °C/min 的速度降温到 - 80 °C,停留一段时间后,投入液氮;

E. 解冻时,升温速度低千 25 °C/min。

来源:丁香实验

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