lodogen 标记法标记抗原

lodogen 标记法是利用 Iodogen（1,3,4,6-tetra chloro- 3α，6α-diphenyl glycouril）不溶于水的特性，在固相支持物表面介导蛋白质碘化过程，所以中止反应极其简单，只需将蛋白质移出反应管，产物也不需要还原过程，减少了蛋白质暴露于氧化系统，有利于蛋白质活性的保持，更适合大分子量蛋白质，如抗体等的 125I 标记。

lodogen 标记法的基本原理是利用 Iodogen（1,3,4,6-tetra chloro- 3α，6α-diphenyl glycouril）不溶于水的特性，在固相支持物表面介导蛋白质碘化过程。

试剂：

(1)Na125I:18.5KBq(0.5mCi);

(2)Iodogen 标记试管的制备：称取 Iodogen10 μg 溶解于 10 μl 二氯甲烷中，加至 1.5 mL 硬质塑料试管底部，以 N₂ 温和地吹干，可见试管底部有点状结晶物。

(3)PB (0.25 mol/ L pH 7.4);

(4) 羊抗兔 IgG 抗体;

仪器：

（1）取底部有明显而均匀结晶物的 Iodogen 标记试管。

（2）依次加入 0.25 mol／L pH 7.4 PB 液 20 μl，Na125I 18.5kBq／10 μl 双蒸水，羊抗兔 IgG 抗体 20 μg／20 μl 于干燥物上，混匀。

（3）放置冰上反应 10 分钟，每间隔 2～3 分钟混合一次。