简介
培养细胞的形态观察实验是通过显微镜观察细胞的形态，从而对其生长状况进行判定的实验。
原理
培养细胞的形态观察实验的基本原理是通过倒置显微镜下观察培养细胞内颗粒多少、透明度的高低及轮廓的清晰程度，可以对培养细胞的生长状态加以判定。
处于良好生长状态的活细胞，其胞质通常是透明、匀质的，胞质内颗粒较少，细胞轮廓很浅、不明显。随着培养时间的延长，细胞中颗粒物质逐渐增多，细胞透明度减弱，细胞轮廓增强，核仁数量也增多。
材料与仪器
器材：
① 传代培养 3 d 的肝细胞
② 传代培养 7 d 的肝细胞
③ 传代培养 3 d 的真皮成纤维细胞
④ 传代培养 7 d 的真皮成纤维细胞。
⑤ 倒置显微镜
⑥ 超净工作台
⑦ CO2 培养箱
试剂:
① D-Hanks 液
② DMEM 培养基（含 10％ 小牛血清）
步骤
培养细胞的形态观察实验基本过程可分为以下几步：
(1) 培养细胞形态类型的观察
A. 将培养 3 d 的传代肝细胞置于倒置相差显微镜下，观察培养细胞的形态、细胞排列方式及彼此间连接的程度。
B. 记录观察的结果。
C. 将肝细胞放回培养箱，取出已培养 3 d 的传代成纤维细胞。
D. 用倒置相差显微镜对成纤维细胞的形态、细胞排列方式及彼此间连接的程度进行观察并记录结果。
E. 肝细胞与成纤维细胞的形态特征的记录结果加以比较。
（2）细胞形态结构及生长状况的观察
A. 将传代培养 3 d 的肝细胞或成纤维细胞置于倒置相差显微镜 10x 物镜下。
B. 对细胞内部结构、透明度、细胞轮廓等进行观察。
C. 用 40x 高倍镜对细胞结构、内容物等作进一步的观察。
D. 记录观察结果，并将细胞放回培养箱，同时取出传代培养 7 d 的肝细胞或成纤维细胞置于倒置相差显微镜下。
E. 分别用 10x 及 40x 的物镜对细胞透明度、细胞轮廓及内容物等进行观察。
F. 记录结果，与传代培养 3 d 细胞的记录结果相比较。
注意事项
1. 对细胞形态进行观察时，需无菌操作，以免污染。
2. 为了减少外界环境对细胞生长的影响，观察细胞时间不宜过长，对多瓶细胞进行观察时，应分批取放。
来源：丁香实验
