简介
鸡胚尿囊培养实验是利用其良尿囊绒膜良好的生化特性用作天然培养基的实验方法。
原理
鸡胚尿囊培养实验的基本原理是利用尿囊绒膜已充分发育 8.5～10 d 龄的鸡胚，由于该膜具有丰富的血管是一种良好的天然培养基，可把所要培养的外植块移至此膜上。
这种培养一般可维持 9～10 d，届时务必把培养物取出，因为鸡胚进一步地发育会导致尿囊绒膜崩溃。
材料与仪器
器材：
① 白色莱杭鸡种蛋
② 牙科钻（或自制开蛋器，为一小型风扇电机接一旋转轴，轴上装有小砂轮）
③ 38 ℃ 孵箱
④ 木制孵化盘
⑤ 牙科镊
⑥ 眼科镊
⑦ 虹膜剪
⑧ 照蛋箱（检查鸡胚发育用）
⑨ 体视显微镜
⑩ 洁净工作台（或接种罩）
⑪ Spemann 吸管。
试剂:
① 碘酒
② 75％ 乙醇
③ 棉球
④ 生理盐水
⑤ 中性红琼脂片
⑥ 玻璃针
⑦ Bouins 固定液
⑧ 熔化石蜡
步骤
鸡胚尿囊培养实验基本过程可分为以下几步：
A. 进行器官外植块移植前 10 d 孵育种蛋 10 个，准备用作尿囊绒膜培养基（宿主）。
B. 移植开始前 3 d 孵育种蛋 10 个，准备用作为外植物（施主）。
C. 移植开始前用照蛋箱检查胚胎孵育及存活情况。孵育 10 d 左右的鸡胚可照见明显的尿囊绒膜的主要血管。选择 2 条血管交接点而又离胚体有一定距离处以铅笔做记号。
D. 以记号为中心，用碘酒及乙醇消毒，再以牙科钻开 1 个 0.8 cm x 0.8 cm 的方孔。
E. 用牙科镊掀开方孔壳片，构成窗户；把壳片放在灭菌的干表玻皿中，
并用盖罩好备用。
F. 用生理盐水湿润壳膜，使移开壳膜时不致伤及尿囊绒膜。
G. 用钟表镊小心掀起并撕去壳膜。此时在体视解剖镜下可见尿囊绒膜及其血管。
H . 至此尿囊绒膜培基已准备就绪。把窗户壳片盖回原处，放在孵箱网格盘上。准备进行移植时用。
I. 透照外植用胚胎，并同上做记号和消毒，用牙科钻开一方窗暴露胚胎。
J. 以中性红琼脂小片染胚胎 1～2 min，此时胚胎结构可以很清晰。
K. 用小剪沿胚盘外缘把整个胚盘剪下，并把它移至盛有生理盐水的表玻皿内，涮洗后去除羊膜及绒膜。
L. 用虹膜刀割取翼芽与腿芽。
M. 以 Spemann 吸管把翼芽或腿芽移入宿主绒毛尿囊膜上。
N. 把窗户壳片盖回原处，用熔化石蜡封固壳片四周。
O. 把宿主放回孵箱，把有窗户的一侧朝下。
P. 继续孵育 9～10 d 后取出移植块。用 Bouins 液固定，其余步骤同一般石蜡切片技术。
本方法的优点是不需复杂的设备，尿囊绒膜可提供较为丰富的营养；其缺点是外植物会受到寄主代谢的影响，尤其是激素的影响。
此外，外植物组织与尿囊绒膜组织易发生粘连，影响外植物的形态形成。
注意事项
1. 选择 2 条血管交接点而又离胚体有一定距离处作为开窗的中心点。
2. 在宿主蛋壳上钻孔时，用力不要过猛，以免伤及壳膜引起尿囊绒膜血管破裂出血。
3. 孵箱的湿度以 60％ 的相对湿度最为适宜。
4. 孵育的种蛋必须经常翻转，一般至少 2 次。
来源：丁香实验
