原理
淀粉样物质是一种无细胞的同质性的嗜伊红性物质,这种物质在化学上属于糖蛋白,是蛋白质与硫酸软骨素所合成的化合物。淀粉样物质染色是一种退行性染色,掌握分化程度较难,所以有人提出刚果红染色不需要进行分化,对于淀粉样物质量较少的情况下,最好结合偏光显微镜方法鉴别。常用 Bennhold 刚果红染色法。
材料与仪器
石蜡组织切片
二甲苯 无水乙醇 中性树胶 蒸馏水 刚果红 盐酸乙醇 碳酸锂 明矾-苏木精
滴管
二甲苯 无水乙醇 中性树胶 蒸馏水 刚果红 盐酸乙醇 碳酸锂 明矾-苏木精
滴管
步骤
刚果红染色液:刚果红 1 g,蒸馏水 100 ml。
1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。
2. 明矾-苏木精染色 2 min。
3. 0.5% 盐酸乙醇分化液 10 s。
4. 流水冲洗,使细胞核呈蓝色。
5. 刚果红染色液染色 2030 min。
6. 1% 碳酸锂处理 15 s,蒸馏水洗 1 min。
7. 80% 乙醇分化 15 s。
8. 流水冲洗 1~2 min。
9. 无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
注意事项
1. 苏木精液染色细胞核,要浅些,便于对比观察。
2. 不同的组织在碳酸锂和 80% 乙醇中,必须严格掌握时间,防止退色过度。
常见问题
结果:淀粉样物质呈红色,细胞核呈蓝色。
来源:丁香实验