原理
此实验同样适用于胰凝乳蛋白、胆碱酯酶和酰基转移酶。可以用作底物的并非只是联丁酰荧光素,乙酰胆碱酯酶荧光素亦可。
联丁酰荧光素 → 荧光素
(无荧光性) (有荧光性)
材料与仪器
酶样品
Tris-HCl 联丁酰荧光素
荧光光度计
Tris-HCl 联丁酰荧光素
荧光光度计
步骤
0.1 mol/L Tris-HCl,pH 8.0
0.05 mmol/L 联丁酰荧光素 [Mr=472.5;溶解 2.36 g 于 5 ml 乙烯基乙二醇一甲醚(甲基溶纤剂)中,95 ml 0.1 mol/L Tris-HCl pH 8.0 作为底物溶液]
配成 2.9 ml 底物溶液需用 0.1 ml 底物样品。在 470 nm 激发,于 510 nm 处测量到荧光。
来源:丁香实验