材料与仪器
酶样品
磷酸钾 邻二氢氯化联茴香胺 H2O2 溶液
分光光度计
磷酸钾 邻二氢氯化联茴香胺 H2O2 溶液
分光光度计
步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.97 ml 实验混合物
0.02 ml 酶样品
开始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L H2O2 溶液
记录 25 ℃ 时、436nm 处吸收值发生变化,ε436=28.3×103 l/(mol·cm)。
注意事项
邻联二茴香胺是致癌的!
常见问题
试剂:
0.1 mol/L 磷酸钾 pH 6.0
0.03 mol/L 邻二氢氯化联茴香胺(3,3'--二羟基对二氨基联苯-二氢氯,Mr=317.2;95 mg 溶于 10 ml 甲醇中)
H2O2 溶液(约 10 mmol/L):0.06 ml 30% H2O2 稀释于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸钾溶液 pH 7.0,在 240 nm 处以缓冲液为对照的吸收值约为 0.50。
来源:丁香实验