材料与仪器
酶样品
磷酸钾 邻甲氧基苯酚 H2O2 溶液
分光光度计
磷酸钾 邻甲氧基苯酚 H2O2 溶液
分光光度计
步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.97 ml 实验混合物
0.02 ml 酶样品(用 0.1 mol/L 磷酸钾溶液 pH 7.0,稀释浓缩的原料溶液大约 2000 倍)
开始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L H2O2 溶液
随后,25 ℃、436nm 处吸收值发生变化,ε436=25.5×103 l/(mol·cm)。(Makinen 和 Tenovon,1982)。
常见问题
试剂:
0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.0
0.02 mol/L 邻甲氧基苯酚(2-甲基苯酚,儿茶酚,氢醌单甲基醚,Mr=124.1;24.8 mg 溶于 10 ml 水中)
H2O2 溶液(约 10 mmol/L):0.06 ml 30% H2O2 稀释于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸钾溶液 pH 7.0,在 240 nm 处以缓冲液为对照的吸收值约为 0.50。
来源:丁香实验