环状沉淀反应实验

可溶性抗原例如细菌的提取物，血清、病毒溶液等与相应抗体反应，在有电解质的情况下，会产生细微的沉淀称为沉淀反应。

沉淀反应与凝集反应的原理基本相同，所不同的是使用的抗原是可溶性的，正因为是可溶性抗原，其单个抗原分子体积小，在单位体积的溶液内所含抗原量多，其总反应面积大，出现反应所需要的抗体量多，因此，试验时是稀释抗原，而不是稀释抗体。引起沉淀反应的抗原称为沉淀原，相应抗体称为沉淀素。

环状沉淀反应是使抗原与抗体在沉淀管内形成交界面，然后在此交界面处出现一环状的乳白色沉淀物（图 1）。出现此环状反应的抗原最高稀释度即为沉淀素的效价。

图 1 环状沉淀试验

马血清（抗原） 兔抗马免疫血清（抗体） 正常兔血清
生理盐水
沉淀管（内径约 2.5～3.0 mm 长约 30 mm） 小试管 毛细吸管 吸管

1. 取 1：25 的马血清 1 ml，用倍比稀释法在小试管中按下表稀释成各种浓度。

undefined1，undefined2分别表示自第 1 管，自第 2 管中吸取 1 ml，余类推。

2. 将 9 个干燥而清洁的沉淀管插在试管架的小孔上，使直立。

3. 用毛细吸管吸取 1：2 的兔抗马免疫血清，加入沉淀管底部，每管约两滴。

4. 用另一毛细吸管吸上面已稀释好的马血清（抗原），按下表加入各管。

从最高稀释度加起，加入时，沿管壁徐徐加入，使与下层兔抗马免疫血清之间形成界面，切勿摇动。第 8 管加生理盐水，第 9 管加稀释兔血清以作对照。

5. 于室温中静置 15～30 分钟后观察结果，在两液面交界处看有无白色环状沉淀出现。

6. 结果记录的方法是凡有白色环状沉淀者，记「+」号，没有沉淀者，记「－」号。最大稀释度的抗原与抗体交界面之间还有白色沉淀者，此管的稀释度即为沉淀素的效价。