原理
批量层析的特点在于层析用树脂不放在柱中,而是放在烧杯或瓶子的容器中;通过搅拌或摇动而混内层析;以过滤或离心的办法分出层析液。
材料与仪器
蛋白质溶液
离子交换层析装置
离子交换层析装置
步骤
1. 在烧杯或锥形瓶中平衡树脂,不断搅拌以促进平衡;
2. 倾泻掉大部分溶液,保留的溶液置要使树脂能轻松的搅拌;
3. 加入样品;
4. 放置 1 h,使蛋白质与树脂充分结合,中间须搅拌几次;
5. 过滤树脂,注意不要使树脂脱水;
6. 用原始溶液在滤器上轻柔的润洗树脂;
7. 将树脂重新放入烧杯中,用离子强度大的溶液处理;
8. 过滤树脂,检测洗脱液中是否含有蛋白质;
9. 若有必要,用离子强度更大的溶液处理树脂,直至目的蛋白被洗出。
来源:丁香实验