SDS-尿素胶凝胶电泳
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原理
当蛋白质的电荷性质与其质量明显相关时。小分子蛋白质在 SDS-PAGE 中的迁移率便不再与它们的分子量成比例。在这种情况下通常使用 SDS-尿素胶另外,SDS-尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳对于免疫沉淀和在低离子强度下不溶的膜蛋白是非常有用的。
材料与仪器
蛋白质溶液
步骤
1. 工作溶液
1.1 溶液 A
30% 丙烯酰胺,0.8% 双丙烯酰胺
1.2 溶液 B
1.5mol/L Tris-HCl(pH8.8),0.4%SDS
1.3 溶液 C
0.5mol/L Tris-HCl(pH8.8),0.4%SDS
2. 溶液的数量
电泳的条件及缓冲液,如染色和脱色溶液与 SDS-PAGE 完全相同。5× 样品缓冲液配制时应含有 8mol/L的尿素。(具体见 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳)。
来源:丁香实验