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SDS-PAGE凝胶电泳及蛋白印记

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2012

①10×Running Buffer
将144g Glycine、30.2g Tris Base、10g SDS溶解于1L双蒸水中。
使用时稀释10倍
②1×Transfer Buffer
将3.03g Tris Base、14.4g Glycine溶解于500mL双蒸水中,加入200mL
Methanol,用双蒸水定容至1L
③牛奶封闭液
将2.0g牛奶溶解于20mLTBST中(对应于一块膜的量)。
④TBST
NaCl 150mM
Tris・Cl(pH7.6) 20mM
Tween-20 1‰(v/v)
⑤TBS
NaCl 150mM
Tris・Cl(pH7.6) 20mM
⑥溶液A
� 0.1M Tris・Cl(pH9.0)
将3.026g Tris Base溶解于200mL双蒸水后调pH至9.0,双蒸水定容至250mL。
� 0.4mM PCA
将4.45mg PCA溶解于4mL 0.1M Tris・Cl(pH9.0)中。
� 100g/L luminol
将75mg luminol溶解于750uL DMSO中。
� 于100mL 0.1M Tris・Cl(pH9.0)中加入4mL 0.4mM PCA和750uL 100g/L luminol。
⑦溶液B
于100mL 0.1M Tris・Cl(pH9.0)中加入200uL 30% H2O2。
⑧显影液 (商品化,按说明书配制)
⑨定影液 (商品化,按说明书配制)

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