改良 Leifson 氏染色法

鞭毛染色的基本原理，是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。

1. 载玻片的准备 菌种材料的准备同硝酸银染色法。

2. 制片

用记号笔在载玻片反面将玻片分成 3～4 个等分区。在每一小区的一端放一小滴菌液。将玻片倾斜，让菌液流到小区的另一端，用滤纸吸去多余的菌液。室温或 37 ℃ 温室自然干燥。

3. 染色

加 Leifson 氏染色液覆盖第一区的涂面，隔数分钟后，加染液于第二区涂面，如此继续染第三四区。间隔时间自行议定，其目的是为了滴定最佳染色时间。在染色过程中仔细观察，当整个玻片都出现铁锈色沉淀、染料表面现出金色膜时，即直接用水轻轻冲洗（不要先倾去染料再冲洗。否则背景不清），染色时间大约 10 min，自然干燥。

4. 镜检

干后用油镜观察。

菌体和鞭毛均呈红色。

1. 玻片要求光滑、洁净，尤其忌用带油迹的玻片（将水滴在玻片上。无油迹破片水能均匀散开）。

2. 挑菌时，尽可能不带培养基。

3. 不要先倾去染料再冲洗。否则背景不清。