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改良 Leifson 氏染色法

相关实验:鞭毛染色实验

最新修订时间:

原理

鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。

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材料与仪器

苏云金芽孢杆菌 假单胞菌 金黄色葡萄球菌
Leifson 氏鞭毛染色液 0.01% 美蓝水溶液
载玻片 盖玻片 凹载玻片 无菌水 凡士林 显微镜

步骤

1. 载玻片的准备 菌种材料的准备同硝酸银染色法。


2. 制片

用记号笔在载玻片反面将玻片分成 3~4 个等分区。在每一小区的一端放一小滴菌液。将玻片倾斜,让菌液流到小区的另一端,用滤纸吸去多余的菌液。室温或 37 ℃ 温室自然干燥。


3. 染色

加 Leifson 氏染色液覆盖第一区的涂面,隔数分钟后,加染液于第二区涂面,如此继续染第三四区。间隔时间自行议定,其目的是为了滴定最佳染色时间。在染色过程中仔细观察,当整个玻片都出现铁锈色沉淀、染料表面现出金色膜时,即直接用水轻轻冲洗(不要先倾去染料再冲洗。否则背景不清),染色时间大约 10 min,自然干燥。


4. 镜检

干后用油镜观察。


菌体和鞭毛均呈红色。

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注意事项

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1. 玻片要求光滑、洁净,尤其忌用带油迹的玻片(将水滴在玻片上。无油迹破片水能均匀散开)。


2. 挑菌时,尽可能不带培养基。


3. 不要先倾去染料再冲洗。否则背景不清。

常见问题

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来源:丁香实验

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