原理
牙髓的发育与神经嵴细胞密切相关,推测DPSCs和SHED可能具有向神经细胞分化的潜能,,事实上,在特殊的体外诱导条件下,DPSCs和SHED能够向神经细胞分化,形成狭长的细胞突触。神经分化的鉴定包括形态学观察和神经特异性分子的表达检测,其中神经特异性分子包括GFAP、巢蛋白(nestin)、神经微丝M(neurofilamentM)、神经元核蛋白(neuronalnuclearprotein,NeuN)、2’,3’-环核苷酸-3’-磷酸二酯酶(CNPase)、βIII微管蛋白(tubulin)和谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarbo×ylase,GAD)。
材料与仪器
DPSCs
灭菌MSC培养基 神经分化培养基 明胶0.1%
培养皿
灭菌MSC培养基 神经分化培养基 明胶0.1%
培养皿
步骤
(a)培养板用明胶包被30min后,晾干。
(b)将细胞以相对低密度接种,接种密度为(0.1-1.0)×108个细胞/cm2,用神经分化培养基培养。
(c)每天更换培养基,通常持续培养4周。
来源:丁香实验