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在液体培养基中形成孢子

相关实验:菌株的构建和四分体孢子的分析实验

最新修订时间:

材料与仪器

培养基

步骤

1)在合适的培养容器中,加入YPD培养基培养,待形成孢子的二倍体细胞生长至 OD600为 2.5〜3.0 (约为 8×107 细胞/mL)。


2)转移1 mL培养液至一支无菌15 mL聚丙烯试管中,1200 g离心5 min。


3)倒去上清,用5 mL无菌水重悬细胞,涡旋振荡使细胞充分悬浮,再按步骤2离心。


4)倒去上清,细胞用1 mL添加了特定二倍体细胞所需营养成分的孢子形成液体培养基悬浮。


5)于30℃,350 r/min以上转速培养2〜3天,在显微镜下检査孢子的形成。


如果酵母菌株难以诱导形成孢子,用YPA培养基预培养细胞。用乙酸作碳源时,酵母菌需要呼吸,而呼吸作用是孢子形成所必需的。

来源:丁香实验

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