材料与仪器
培养基
步骤
1)在合适的培养容器中,加入YPD培养基培养,待形成孢子的二倍体细胞生长至 OD600为 2.5〜3.0 (约为 8×107 细胞/mL)。
2)转移1 mL培养液至一支无菌15 mL聚丙烯试管中,1200 g离心5 min。
3)倒去上清,用5 mL无菌水重悬细胞,涡旋振荡使细胞充分悬浮,再按步骤2离心。
4)倒去上清,细胞用1 mL添加了特定二倍体细胞所需营养成分的孢子形成液体培养基悬浮。
5)于30℃,350 r/min以上转速培养2〜3天,在显微镜下检査孢子的形成。
如果酵母菌株难以诱导形成孢子,用YPA培养基预培养细胞。用乙酸作碳源时,酵母菌需要呼吸,而呼吸作用是孢子形成所必需的。
来源:丁香实验