材料与仪器
盐酸 用前新鲜配制 溴化氰活化 Sepharose 4B (Pharmacia Biotech)
步骤
1) 制备标记的被连接的寡核苷酸探针
2) 称出3 g溴化氰活化的Sepharose 4B (1 g冻干树脂可得到终体积约3. 5 mL的凝胶体积)。
3) 将干树脂置于一个15 mL的锥形聚丙烯管中。用10 mL lmmol/L盐酸水化树脂,弹击及来回颠倒管子以轻轻混匀。1 min后,将浆状树脂移入一个60 mL粗烧结玻璃漏斗中,缓缓倒入500 mL 1 mmol/L盐酸流过漏斗以洗涤和溶胀树脂(这个过程将花费约 15 min)。
4) 用100 mL水洗涤树脂,然后用100 mL 10 mmol/L, pH 8.0的磷酸钾洗涤。
5) 将寡核苷酸偶联于溴化氰活化Sepharose 4B上
来源:丁香实验